研究者詳細 - 木村　康二

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RELATIONSHIP BETWEEN FETAL ABNORMALITIES AND PERIPHERAL STEROID CONCENTRATIONS DURING GESTATION IN COWS TRANSFERRED WITH EMBRYOS PRODUCED BY SOMATIC CELL NUCLEAR TRANSFER

M. Hirako, H. Takahashi, K. Kimura, N. Adachi, S. Akagi

REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT 22 ( 1 ) 187 - 187 2010年

ウシ卵巣の黄体の有無と卵管上皮細胞の精子貯蔵能およびプロジェステロン濃度の関係

坂口陽祐, 大村麻奈美, 松山秀一, 岩田尚孝, 木村康二, 門司泰典, 桑山岳人

日本繁殖生物学会講演要旨集 103 121 - 121 2010年

記述言語：日本語出版者・発行元：公益社団法人日本繁殖生物学会

【目的】ウシにおいて、卵管上皮細胞には精子を排卵時まで貯蔵するという重要な役割がある。しかし卵管上皮細胞は発情周期によりその形態や機能が変化することが知られているが、精子貯蔵機能の変化は明らかとされていない。そこで本実験では、異なる発情周期にあるウシの卵管上皮細胞を用いて、精子貯蔵能と卵管に含まれるプロジェステロン濃度の関係を検討した。【方法】機能黄体を有し優勢卵胞（> 10mm）の無い卵巣より採取した卵管対を黄体区、退行黄体・グラーフ卵胞（> 20mm）を有した卵管対を卵胞区とした。それぞれの卵管対より上皮細胞を採取し、精子と5分間共培養後、遠心分離により卵管上皮細胞接着精子を分離し、その接着率を観察した。卵管上皮細胞と共培養を行わない精子（コントロール）と卵管上皮細胞接着精子をそれぞれ0、3、5時間培養後、生存性・運動性・先体反応誘起率を観察した。0時間を基準とし、各時間の維持率を算出した。またこれら卵管自体に含まれるプロジェステロン濃度を測定した。【結果】共培養直後の卵管上皮細胞への精子接着率は、卵胞区において有意に高い値を示した。5時間培養後において、コントロール・黄体区と比較し、卵胞区で有意に高い精子生存性と低い先体反応誘起率が観察された。精子運動性においては、3、5時間培養後に同様に卵胞区で高い維持率が観察された。また各区の卵管対の間には差は観られなかった。プロジェステロン濃度においては、卵胞区と比較し黄体区の方が有意に高く、また黄体区の黄体を有した卵巣側卵管はその対と比較して有意に高かった。これらより発情周期による機能黄体の有無は、卵管のプロジェステロン濃度と精子貯蔵能と大きく関わっている可能性が示された。

DOI： 10.14882/jrds.103.0.121.0

CiNii Article

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Renewal of techniques related to embryo transfer in cattle : a novel superovulation method using aluminum hydroxide gel

KIMURA Koji, MATSUYAMA Shuichi, IWATA Hisataka, SEKI Makoto, HIRAKO Makoto

The Journal of reproduction and development 55 j60 - j61 2009年8月

ZP3 promoter is not enough to analyze the early expressing genes during oogenesis, such as Oog1 Analysis of Oog1, an oocyte-specific gene, using transgenic RNAi approach. 査読

Imaichi H, Okazaki E, Tsukamoto S, Ohota Y, Kito S, Kimura K, Imai H, Minami N

42nd Society for the Study of Reproduction 2009年

ZP3 Promoter Is Not Enough to Analyze the Early Expressing Genes During Oogenesis, Such as Oog1

Hisashi Imaichi, Rieko Okazaki, Satoshi Tsukamoto, Yuki Ohta, Seiji Kito, Koji Kimura, Hiroshi Imai, Naojiro Minami

BIOLOGY OF REPRODUCTION 128 - 128 2009年

ウシにおけるIFN-tau分泌動態と受胎との関係解明

松山秀一, 小島孝敏, 加藤聡, 白築章吾, 田中裕, 永瀧圭一, 星昭一, 室井浩一, 木村康二

日本繁殖生物学会講演要旨集 102 1086 - 1086 2009年

記述言語：日本語出版者・発行元：公益社団法人日本繁殖生物学会

【目的】ウシにおいて胚から分泌されるインターフェロン・タウ（IFN-tau）が妊娠維持に関与することが示されているが、妊娠早期におけるIFN-tau分泌動態と受胎性との直接的な因果関係は未解明のままである。近年、子宮内のIFN-tauが血液中に混入し、末梢白血球中に存在するインターフェロン誘導性遺伝子15（ISG15）の発現を直接刺激する可能性が示された。そこで本研究では、子宮内におけるIFN-tau投与量と末梢白血球中ISG15の発現量との関係について検討し（実験１）、人工授精後の末梢白血球中ISG15の発現量を測定する（実験２）ことで、妊娠認識時期におけるIFN-tau分泌動態と受胎性との直接的な因果関係を解明することを目的とした。【方法】実験1：肉用牛を用い、発情後16-17日目にIFN-tauの子宮内投与（IFN-tau 0, 500, 1000 μg）を行った。投与前後を通じて2-4時間毎に採血を行い、末梢白血球中のISG15発現量をリアルタイムPCR法により測定した。実験2：肉用牛を用いて、発情を確認した日に人工授精を行った。人工授精後、経時的に採血を行い、末梢白血球中のISG15発現量をリアルタイムPCR法により測定した。【結果および考察】IFN-tauの子宮内投与により、末梢白血球中のISG15発現量は増加し、投与後4時間でピークを示した。その後、徐々に投与前のレベルまで減少した。さらに、投与後4時間におけるISG15発現量とIFN-tau投与量との間に正の相関が認められたことから、末梢白血球中ISG15発現量を測定することで子宮内IFN-tau分泌量を推定できる可能性が示された。また、人工授精により受胎した群の発情後18日目におけるISG15発現量は、不受胎群と比較して高い傾向にあった。以上の結果から、人工授精後の妊娠認識時期における子宮内IFN-tau分泌量が受胎に関与する可能性が示された。

DOI： 10.14882/jrds.102.0.1086.0

CiNii Article

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Oog1 is a maternal effect gene required for the development of mouse preimplantation embryo 査読

N. Minami, H. Imaichi, S. Tsukamoto, Y. Ohta, S. Kito, K. Kimura, H. Imai

REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS 43 149 - 150 2008年7月

Effect of FCS and BSA on hatching rate, apoptosis, and stress activated protein kinase activity in bovine blastocysts

Hisataka Iwata, Yosuke Sakaguchi, Yoshihiro Kon, Koji Kimura, Takehito Kuwayama, Yasuniri Monji

BIOLOGY OF REPRODUCTION 94 - 94 2008年

Analysis of Oog1, an oocyte-specific gene, using transgenic RNAi approach

Hisashi Imaichi, Satoshi Tsukamoto, Yuki Ohta, Seiji Kito, Koji Kimura, Hiroshi Imai, Naojiro Minami

BIOLOGY OF REPRODUCTION 133 - 133 2008年

黒毛和種のワンショット過剰排卵処理法の確立に関する研究(2) : 筋肉内投与法におけるホルモン量および試作ゲルの有効性の検討

林, 登, 星野, 洋一郎, 加藤, 誠二, 坂口, 慎一, 三品, 賢三, 関, 誠, 竹内, 昭司, 角川, 博哉, 木村, 康二

岐阜県畜産研究所研究報告 ( 7 ) 21 - 25 2007年7月

記述言語：日本語

黒毛和種における水酸化アルミニウムゲルを用いた卵胞刺激ホルモン（FSH）の1回投与法（ワンショット法）による過剰排卵処理法について、FSHの投与量及び試作水酸化アルミニウムゲルの実用性を検討した。試験1として、ワンショット法におけるホルモンの投与量を検討するため、黒毛和種経産牛にFSH30AU（n＝15）あるいは25AU（n＝13）を筋肉内投与する過剰排卵処理を実施し、採卵成績として採卵時の黄体数、大卵胞数、採卵数および正常胚数を調査し比較した。また試験2として、従来の市販水酸化アルミニウムゲル（Sigma社）に替えて、川崎三鷹製薬株式会社で開発された試作水酸化アルミニウムゲルを用いたワンショット法（FSH25AU筋肉内投与）と漸減投与法（FSH5、5、3、3、2、2計20AU筋肉内投与）による過剰排卵処理を、黒毛和種経産牛8頭に各1回ずつ実施し採卵成績を比較した。1．試験1における採卵時の平均黄体数と大卵胞数は、30AU区でそれぞれ7.0±4.8個と1.7±1.0個、25AU区でそれぞれ7.2±6.4個と1.0±0.8個であり、いずれにおいても両区間に有意な差は認められなかった。また、採卵個数と正常胚数についても、30AU区でそれぞれ5.2±4.7個と3.5±4.2個、25AU区でそれぞれ5.8±6.0個と4.8±5.4個であり、いずれにおいても両区間に有意な差は認められなかった。しかし、胚の品質は25AU区でより優れていた。2．試験2における採卵時の平均黄体数と大卵胞数は、ワンショット区でそれぞれ7.9±6.6個と3.6±4.8個、漸減投与区でそれぞれ9.4±6.3個と5.1±5.4個であり、いずれにおいても両区間に有意な差は認められなかった。また、採卵個数と正常胚数も、ワンショット区でそれぞれ6.1±5.8個と4.5±4.4個、漸減投与区でそれぞれ6.0±3.5個、2.6±3.0個であり、いずれにおいても両区間に有意な差は認められなかった。しかし、胚の品質ではワンショット区でより良い結果が得られた。以上の結果から、黒毛和種における水酸化アルミニウムゲルを用いたFSHの1回投与による過剰排卵処理では、FSHの投与量を25AUまで減量できることが示唆された。また新たに開発された水酸化アルミニウムゲルも従来のゲルの代わりに用いることができることが明らかとなった。

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A comparison of pregnancy maintenance after embryo transfer of Day 7 or 13 bovine embryos and the relationship between interferon-tau production of day 13 bovine embryos and pregnancy success

K. Kimura, N. Hayashi, H. Iwata

REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT 19 ( 1 ) 222 - 223 2007年

第3章流・死産の発生要因の解明(4)妊娠末期のクローン胎子の発育および分娩発来機構と正常分娩誘起法の開発に関する研究

平子誠, 平子誠, 青木真理, 青木真理, 木村康二, 木村康二, 花房泰子, 石崎宏, 假屋喜弘

農林水産省農林水産技術会議事務局研究成果 ( 444 ) 2007年

ウシ胚盤胞期胚の培養条件について

佐々木康仁, 今義拓, 坂口陽祐, 山本太陽, 木村康二, 岩田尚孝, 桑山岳人, 門司恭典

日本繁殖生物学会講演要旨集 100 20077 - 20077 2007年

記述言語：日本語出版者・発行元：公益社団法人日本繁殖生物学会

【目的】胚盤胞の透明帯（ZP）からの脱出は、着床前の重要なステップの一つである。また胚盤胞期胚以降の培養条件については不明な点が多い。本研究では、胚盤胞期胚をさらに30時間培養し、培地に添加する蛋白（血清およびBSA）、グルコース、ヒアルロン酸およびZPの切開が胚の脱出率に与える影響について検討した。
【方法】全ての培養には、合成卵管液(SOF)を用いた。授精処理後7日目に、5%血清(FCS)添加SOF(FCS-SOF)中で発生した胚盤胞を、それぞれの試験用培地(1胚/10μl)で30時間培養し、胚の脱出率と細胞数を調べた。FCS(5%)とBSA(5mg/ml)をそれぞれ添加した培地(FCS-SOFおよびBSA-SOF)を試験に用いたところ、胚盤胞の脱出率はBSA-SOFで高く(48%)、FCS-SOFでは低かった(25%)。FCSもしくはBSA-SOFにグルコース(1.5, 5.6, および15mM)をそれぞれ添加したところ、高濃度のグルコースの添加は、FCS-SOFでは脱出率を増やしたがBSA-SOFでは効果がなかった。異なる濃度のBSA(5, 15mg/ml)と血清(5, 20%)を培地に添加すると、FCSの濃度の増加は胚の脱出率を減らし(15%)、BSＡでは逆に増加した(65%)。透明帯を切開した胚盤胞をBSA-SOFおよびFCS-SOF中で培養するとBSA-SOFでは80％が脱出したがFCS-SOFでは28.8％が脱出した。ヒアルロン酸を2.5mg/mlの濃度で添加したFCSもしくはBSA-SOFで胚を培養するといずれの培地においても脱出率を促進しなかった。これらのことから胚盤胞期胚の操作や胚盤胞期胚以降の培養においては、FCSよりBSAを添加した培地のほうが胚の発育に良いことが示された。

DOI： 10.14882/jrds.100.0.20077.0

CiNii Article

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Expression of bovine interferon-tau variants according to sex and age of conceptuses.

Angela M. Walker, Koji Kimura, R. M. Roberts

BIOLOGY OF REPRODUCTION 93 - 93 2006年

The effect of glucosamine concentration on the development and sex ratio of bovine embryos.

Koji Kimura, Hisataka Iwata, Jeremy G. Thompson

BIOLOGY OF REPRODUCTION 124 - 124 2006年

哺乳動物の妊娠確立メカニズム

木村康二

Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌 22 ( 3 ) 101 - 118 2005年10月

記述言語：英語出版者・発行元：日本哺乳動物卵子学会

妊娠の成立のためのメカニズムは各動物種で異なる。マウスでは交尾時の子宮頸管刺激による下垂体由来プロラクチンが妊娠黄体形成に関与し、着床後は胎盤性ラクトジェンが妊娠を維持する。ヒトでは絨毛組織から分泌されるhCGが初期の妊娠を維持する。ウシやヒツジでは胚から分泌されるrFNI-τが子宮内膜からのPGF2αの分泌動態を変化させ黄体の退行を防ぐ。一方ブタでは、胚から分泌されるエストロジェンが妊娠認識物質として働き、子宮からのPGF2α分泌を血流方向から子宮腔方向へ変化させ、黄体退行を防ぐと考えられている。

CiNii Article

CiNii Books

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その他リンク： http://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010721570

A compariosn of IFN-tau messenger RNA expression between somatic nuclear transfer and in vitro produced female bovine blastocysts.

K Kimura, S Akagi, S Takahashi, H Iwata, H Kadokawa, M Aoki, M Hirako

BIOLOGY OF REPRODUCTION 230 - 230 2005年

水酸化アルミニウムゲルを用いたFSH1回投与によるウシ過剰排卵誘起法

木村康二

畜産技術 = Livestock technology ( 590 ) 2 - 4 2004年7月

Successful superovulation of cattle using a single intramuscular injection of FSH with aluminum hydroxide gel.

K Kimura, M Hirako, H Iwata, M Aoki

BIOLOGY OF REPRODUCTION 237 - 238 2004年

Responsiveness of rabbits to superovulation treatment by single injection of follicle-stimulating hormone mixed with aluminum hydroxide gel.

S Hashimoto, K Kimura, T Kuramochi, K Aoyagi, M Hirako, M Kawaguchi, H Iwata, H Takahashi, M Hirao, K Kitada, K Hirasawa, M Ueda

BIOLOGY OF REPRODUCTION 236 - 237 2004年

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