Faculty Profiles - WAKAI Takuya

MISC - WAKAI Takuya

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ミャンマー連邦の畜産行政

田中穂積, 若井拓哉, 金川弘司

北海道獣医師会雑誌 49 ( 9 ) 366 - 370 2005.9

自治医科大学におけるブタを用いた医学教育と研究

田中穂積, 和久井亨, 若井拓哉, 吉野浩之, 河野正樹, 岡田真樹, 筒井真理子, 鳥取潤一, 小林英司

日本獣医学会学術集会講演要旨集 140th 224 - 224 2005.8

レシピエント卵子の体外成熟培養時間がミニブタ体細胞核の再構築およびクローンはいの発生に及ぼす影響

杉村智史, 若井拓哉, 山中賢一, 庄司孟央, 佐々田比呂志, 佐藤英明

Journal of Reproduction and Development 51 ( Supplement ) J104 2005.8

アクチンフィラメントを指標としたミニブタ再構築はい活性化方法の最適化

山中賢一, 杉村智史, 庄司孟央, 若井拓哉, 佐々田比呂志, 佐藤英明

日本畜産学会大会講演要旨 105th 12 2005.8

低単位の性腺刺激ホルモンによるミニブタの発情誘起

若井拓哉, 田中穂積, 山中賢一, 杉村智志, 筒井真理子, 鳥取潤一, 佐々田比呂志, 佐藤英明, 小林英司

Journal of Reproduction and Development 51 ( Supplement ) J135 - j135 2005.8

Language：Japanese Publisher：(一社)日本繁殖生物学会

【目的】トランスジェニックブタや体細胞クローンブタを作出するためには、ドナーブタの過剰排卵処置やレシピエントブタの発情周期の同期化などの発情周期を確実に制御することが重要である。しかしながら、ミニブタでは発情誘起に関する報告は少ない。そこで本研究ではミニブタにおける発情誘起方法を確立するために、低単位のPMSGとhCGの併用投与による発情誘起を試みた。【方法】（実験1）供試ブタは未経産のクラウン系ミニブタ（8ヵ月齢）、メキシカンへアレス4頭（5～10ヵ月齢）、中国系小型ブタ2頭（9ヵ月齢）および三元交雑ミニブタ4頭（4.5～9.5ヵ月齢）を用いた。それぞれPMSG 300 IU＋hCG 150 IUを筋肉内注射し発情の発現を調べた。PMSGとhCG投与後 72時間にhCG 150 IUを筋肉内注射し、その後40から48時間に卵巣の状態を観察した。（実験2）三元交雑ミニブタ8頭（6～9.5ヵ月）を用い、処理区AではPMSG 300 IU＋hCG 150 IU、処理区BではPMSG 200 IU＋hCG 100 IUを投与し72時間後にそれぞれhCG 150 ,750 IUを投与した。hCG投与後43～45時間に卵管を還流し排卵数を調べた。またクラウン系ミニブタ6頭（10.5～14.5ヵ月）を用い、処理区AおよびBで誘起された発情期に雄豚と交配後、発情周期の回帰と超音波診断を指標として妊娠の成立を判定した。【結果】（実験1）正常な発情周期を持った個体でホルモン投与後3～4日にクラウン系の75%、その他の系統では100%が発情を示した。一方、性成熟前の個体では発情の発現が認められなかった。また、排卵点の数は系統間で差が見られなかった。（実験2）処理区Aでは回収した卵のうち77%が成熟卵子であったが、処理区Bでは回収した卵の全てが成熟卵子であった。また、誘起された発情期に交配したところ、処理区Aでは4頭中2頭が妊娠し、処理区Bでは1頭中1頭が妊娠した。

DOI： 10.14882/jrds.98.0.163.0

CiNii Article

J-GLOBAL

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Effect of duration for in vitro maturation of recipient oocytes on nuclear remodeling and embryo development after SCNT in miniature pigs.

Sugimura Satoshi, Wakai Takuya, Yamanaka Kenichi, Syoji Takehisa, Sasada Hiroshi, Sato Eimei

The Journal of Reproduction and Development Supplement 98 ( 0 ) 100 - 100 2005.8

Publisher：日本繁殖生物学会

【目的】我々は，レシピエント卵子の体外成熟培養時間および顕微操作とそれに伴う時間の経過がレシピエント卵子のMPF活性レベルを低下させる一因であることを報告した(本学会第95回大会)。そこで今回は，MPF活性レベルに左右されると考えられるドナー細胞核の再構築およびクローン胚の発生に及ぼすレシピエント卵子の体外成熟培養時間の影響を調べた。【方法】食肉処理場由来のブタ卵巣から未成熟卵母細胞を採取し，体外成熟培養した。成熟培養後36，40，44および52時間に第一極体放出が確認できた成熟卵子をレシピエント卵子とした。ドナー細胞にはミニブタ胎子線維芽細胞を用いた。ドナー細胞を卵細胞質内に注入し，注入後3時間にイオノマイシン 20分間，120v/mm 60&micro;secの直流パルス5秒間隔2回，およびサイトカラシンD添加シクロヘキシミド5時間の条件で活性化しクローン胚を作製した。ドナー細胞注入後3時間で早期染色体凝集(PCC)率，免疫細胞化学的手法による紡錘体と染色体の形成様式および体外発生培養後6時間で前核様核形成率を調べた。さらに，発生培養後2日で卵割率，7日で胚盤胞期胚発生率を調べた。【結果】PCC率は成熟培養時間の経過に伴い低下する傾向を示した。培養36および44時間では多くのドナー細胞核が正常な紡錘体を形成したのに対し，培養44および52時間では異常な紡錘体を形成したものが多く観察された。前核様核形成率はすべての培養時間で有意な差は認められなかったが，培養36および40時間で2前核様核を形成したクローン胚が多かった。顕微操作後もMPF活性レベルが高度に維持されていた成熟培養36および40時間では胚盤胞期胚発生率が他の培養区に比べ高い傾向であった。以上の結果，ミニブタ体細胞クローン胚ではレシピエント卵子の高いMPF活性レベルがPCC形成に必要であり，その後のドナー細胞核の正常な核の再構築を誘導することが示唆された。

CiNii Article

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アクチンフィラメントを指標としたミニブタ再構築胚活性化方法の最適化

山中賢一, 杉村智史, 庄司孟央, 若井拓哉, 佐々田比呂志, 佐藤英明

日本畜産学会大会講演要旨集 105回 12 - 12 2005.8

ミャンマー連邦の畜産

田中穂積, 若井拓哉, 金川弘司

北海道獣医師会雑誌 49 ( 7 ) 13 - 17 2005.7

ブタ核移植技術の現状と応用

若井拓哉, 佐藤英明, 田中穂積, 小林英司

Organ Biology 11 ( 2 ) 169 - 169 2004.5

実験動物としての豚の現況

田中穂積, 若井拓哉, 吉野浩之, 椎貝正太, 小林英司

Organ Biology 11 ( 1 ) 33 - 40 2004.4

カフェイン添加によるMPF活性の低下抑制およびドナー細胞の条件がミニブタ再構築はいの発生に及ぼす影響

山中賢一, 川原学, 若井拓哉, 杉村智史, 佐々田比呂志, 佐藤英明

日本畜産学会大会講演要旨 103rd 104 2004.3

カフェイン添加によるMPF活性の低下抑制およびドナー細胞の条件がミニブタ再構築胚の発生に及ぼす影響

山中賢一, 川原学, 若井拓哉, 杉村智史, 佐々田比呂志, 佐藤英明

日本畜産学会大会講演要旨集 103回 104 - 104 2004.3

声の広場家畜豚の実験使用によるE型肝炎ウイルス対策

田中穂積, 吉野浩之, 若井拓哉, 袴田陽二, 椎貝正太, 長尾慶和, 岡本宏明, 小林英司

Organ Biology 10 ( 4 ) 339 - 347 2003.12

譲渡犬の実験使用中止の動向とその対応に関するアンケート調査

椎貝正太, 長尾慶和, 吉野浩之, 若井拓哉, 袴田陽二, 田中穂積, 小林英司

Organ Biology 10 ( 4 ) 321 - 329 2003.12

Language：Japanese Publisher：(一社)日本臓器保存生物医学会

2002年度における大学医学部附属実験施設を対象として,中型動物を用いた実験の実態について,特に譲渡犬と家畜ブタの使用状況等に関する調査を行った.無効回答1件を含む94件から回答が得られ,回収率は82%であった.イヌは全実験施設のうち83%で使用され,現在も譲渡犬を使用している施設は17%であった.ブタは56%で使用され,そのうち家畜ブタを使用している施設は48%で,ブタ使用施設の約8割が家畜ブタを使用していた.平均使用頭数は,譲渡犬の平均78.8頭に対し,家畜ブタは平均31.6頭と少なかった.家畜ブタの年間使用頭数は,1〜10頭の施設が50%を占めており,利用数の少ない施設が大半であった.家畜ブタに対する検疫で,何らかの検疫を実施していると回答したのは51%であった

J-GLOBAL

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中国海南省の在来豚の現況と世界の実験用豚の趨勢

田中穂積, 王希龍, 若井拓哉, 小林英司, 金川弘司

北海道獣医師会雑誌 47 ( 12 ) 440 - 443 2003.12

家畜豚の実験使用におけるE型肝炎ウイルス対策

田中穂積, 吉野浩之, 若井拓哉, 袴田陽二, 椎貝正太, 長尾慶和, 岡本宏明, 小林英司

Organ Biology 10 ( 4 ) 339 - 347 2003.12

ピギーバック方式を用いたブタ肝移植

山内仁, 吉野浩之, 井上成一朗, 清水尚, 藤代準, 若井拓哉, 金子隆志, 高橋将文, 袴田陽二, 田中穂積, 小林英司

今日の移植 16 ( 6 ) 635 - 636 2003.11

Non-penetrating vascular closure staples (VCS) clipを用いたブタ部分小腸移植法

吉野浩之, 山内仁, 井上成一朗, 清水尚, 藤代準, 若井拓哉, 金子隆志, 高橋将文, 袴田陽二, 田中穂積, 小林英司

今日の移植 16 ( 6 ) 637 - 638 2003.11

Activity of Maturation Promoting Factor (MPF) and distribution of mitochondria in murine in vivo and in vitro matured oocytes with different culture media from IVM.

H Yoshida, N Aono, T Yoshida, T Wakai, H Sasada, E Sato

FERTILITY AND STERILITY 80 S267 - S267 2003.9

Activation of porcine reconstituted embryos by complex treatment

FUCHINOUE Kohei, KAWAHARA Manabu, WAKAI Takuya, SASADA Hiroshi, KYONO Koichi, SATO Eimei

Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌 19 ( 2 ) S17 2002.4

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