2024/03/21 更新

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ナカノ ミチヨ
仲野 道代
NAKANO Michiyo
所属
医歯薬学域 教授
職名
教授
外部リンク

学位

  • 大阪大学博士(歯学) ( 大阪大学 )

研究分野

  • ライフサイエンス / 社会系歯学

所属学協会

  • 日本小児歯科学会

  • 岡山県小児保健協会

  • 歯科虐待防止研究会

  • 日本小児保健協会

  • 国際歯科研究学会日本部会

  • 歯科基礎医学会

  • 日本歯科医学教育学会

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論文

  • Investigation of periodontal disease development and Porphyromonas gulae FimA genotype distribution in small dogs. 国際誌

    Junya Yasuda, Hidemi Yasuda, Ryota Nomura, Saaya Matayoshi, Hiroaki Inaba, Enrique Gongora, Naoki Iwashita, So Shirahata, Noriyuki Kaji, Tatsuya Akitomo, Chieko Mitsuhata, Jumpei Uchiyama, Tomoki Fukuyama, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano, Masaru Murakami

    Scientific reports   14 ( 1 )   5360 - 5360   2024年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    In dogs, Porphyromonas gulae is a major periodontal pathogen with 41-kDa proteins polymerizing to form a filamentous structure called fimbriae or pili, termed FimA. FimA is classified into three genotypes: A, B, and C, and there are combinations of types A, B, C, A/B, A/C, B/C, and A/B/C. Periodontal disease is the most common oral disease in small dogs, but the periodontal disease status and P. gulae colonization at each dog age and breed remain unclear. In this study, we stratified 665 small dogs and analyzed the periodontal status and distribution of P. gulae with each FimA genotype. Dogs with periodontal disease and FimA genotype tended to increase with age. The dogs with at least one FimA genotype had significantly more severe periodontal disease compared with P. gulae-negative dogs (P < 0.01). Additionally, periodontal status was significantly associated with specific FimA genotype distribution in Toy Poodles and Chihuahuas (P < 0.05), whereas there was no such association in Dachshunds. These results suggest that the onset of periodontal disease and P. gulae colonization are related and progress with age. The relationship between periodontal disease and FimA genotype may differ depending on the dog breeds.

    DOI: 10.1038/s41598-024-55842-8

    PubMed

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  • Transcriptomic analysis of Porphyromonas gingivalis-infected head and neck cancer cells: Identification of PLAU as a candidate prognostic biomarker. 国際誌

    Masakazu Hamada, Hiroaki Inaba, Kyoko Nishiyama, Sho Yoshida, Yoshiaki Yura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Narikazu Uzawa

    Journal of cellular and molecular medicine   28 ( 4 )   2024年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Periodontal disease is a risk factor for head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC), and Porphyromonas gingivalis, a major periodontal pathogen, has been identified as a specific and potentially independent microbial factor that increases the risk of cancer mortality. Gene expression in HNSCC due to P. gingivalis infection and how changes in gene expression affect the prognosis of HNSCC patients are not clarified. When P. gingivalis was cultured with HNSCC cells, it efficiently adhered to these cells and enhanced their invasive ability. A transcriptome analysis of P. gingivalis -infected HNSCC cells showed that genes related to migration, including CCL20, CITED2, CTGF, C8orf44-SGK3, DUSP10, EGR3, FUZ, HBEGF, IL1B, IL24, JUN, PLAU, PTGS2, P2RY1, SEMA7A, SGK1 and SIX2, were highly up- or down-regulated. The expression of up-regulated genes was examined using the expression data of HNSCC patients obtained from The Cancer Genome Atlas (TCGA) database, and the expression of 5 genes, including PLAU, was found to be higher in cancer tissue than in solid normal tissue. An analysis of protein-protein interactions revealed that these 5 genes formed a dense network. A Cox regression analysis showed that high PLAU expression levels were associated with a poor prognosis in patients with TCGA-HNSCC. Furthermore, the prognostic impact correlated with tumour size and the presence or absence of lymph node metastasis. Collectively, these results suggest the potential of PLAU as a molecular prognostic marker in HNSCC patients. Further in vivo and in vitro studies are needed to verify the findings of this study.

    DOI: 10.1111/jcmm.18167

    PubMed

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  • Inhibitory Effects of Shikonin Dispersion, an Extract of Lithospermum erythrorhizon Encapsulated in β-1,3-1,6 Glucan, on Streptococcus mutans and Non-Mutans Streptococci. 国際誌

    Ryota Nomura, Yuto Suehiro, Fumikazu Tojo, Saaya Matayoshi, Rena Okawa, Masakazu Hamada, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano, Rika Unesaki, Kazuya Koumoto, Keiko Kawauchi, Takahito Nishikata, Tatsuya Akitomo, Chieko Mitsuhata, Masatoshi Yagi, Toshiro Mizoguchi, Koki Fujikawa, Taizo Taniguchi, Kazuhiko Nakano

    International journal of molecular sciences   25 ( 2 )   2024年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Shikonin is extracted from the roots of Lithospermum erythrorhizon, and shikonin extracts have been shown to have inhibitory effects on several bacteria. However, shikonin extracts are difficult to formulate because of their poor water solubility. In the present study, we prepared a shikonin dispersion, which was solubilized by the inclusion of β-1,3-1,6 glucan, and analysed the inhibitory effects of this dispersion on Streptococcus mutans and non-mutans streptococci. The shikonin dispersion showed pronounced anti-S. mutans activity, and inhibited growth of and biofilm formation by this bacterium. The shikonin dispersion also showed antimicrobial and antiproliferative effects against non-mutans streptococci. In addition, a clinical trial was conducted in which 20 subjects were asked to brush their teeth for 1 week using either shikonin dispersion-containing or non-containing toothpaste, respectively. The shikonin-containing toothpaste decreased the number of S. mutans in the oral cavity, while no such effect was observed after the use of the shikonin-free toothpaste. These results suggest that shikonin dispersion has an inhibitory effect on S. mutans and non-mutans streptococci, and toothpaste containing shikonin dispersion may be effective in preventing dental caries.

    DOI: 10.3390/ijms25021075

    PubMed

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  • Diagnosis of maxillary lateral incisor dens invaginatus and therapeutic approach

    Setsuyo Morimoto, Kana Goto, Asaumi Haruka, Tabata Keiko, Daiki Matsuoka, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Pediatric Dental Journal   33 ( 3 )   216 - 222   2023年12月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/j.pdj.2023.06.003

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  • Potential Role of the Intratumoral Microbiota in Prognosis of Head and Neck Cancer. 国際誌

    Masakazu Hamada, Hiroaki Inaba, Kyoko Nishiyama, Sho Yoshida, Yoshiaki Yura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Narikazu Uzawa

    International journal of molecular sciences   24 ( 20 )   2023年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    The tumor microbiome, a relatively new research field, affects tumor progression through several mechanisms. The Cancer Microbiome Atlas (TCMA) database was recently published. In the present study, we used TCMA and The Cancer Genome Atlas and examined microbiome profiling in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC), the role of the intratumoral microbiota in the prognosis of HNSCC patients, and differentially expressed genes in tumor cells in relation to specific bacterial infections. We investigated 18 microbes at the genus level that differed between solid normal tissue (n = 22) and primary tumors (n = 154). The tissue microbiome profiles of Actinomyces, Fusobacterium, and Rothia at the genus level differed between the solid normal tissue and primary tumors of HNSCC patients. When the prognosis of groups with rates over and under the median for each microbe at the genus level was examined, rates for Leptotrichia which were over the median correlated with significantly higher overall survival rates. We then extracted 35 differentially expressed genes between the over- and under-the-median-for-Leptotrichia groups based on the criteria of >1.5 fold and p < 0.05 in the Mann-Whitney U-test. A pathway analysis showed that these Leptotrichia-related genes were associated with the pathways of Alzheimer disease, neurodegeneration-multiple diseases, prion disease, MAPK signaling, and PI3K-Akt signaling, while protein-protein interaction analysis revealed that these genes formed a dense network. In conclusion, probiotics and specific antimicrobial therapy targeting Leptotrichia may have an impact on the prognosis of HNSCC.

    DOI: 10.3390/ijms242015456

    PubMed

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  • Porphyromonas gingivalis infection in the oral cavity is associated with elevated galactose-deficient IgA1 and increased nephritis severity in IgA nephropathy.

    Seigo Ito, Taro Misaki, Yasuyuki Nagasawa, Ryota Nomura, Shuhei Naka, Akiko Fukunaga, Daiki Matsuoka, Saaya Matayoshi, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Clinical and experimental nephrology   2023年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    BACKGROUND: The relationship between the major periodontal bacteria, Porphyromonas gingivalis, and the pathogenesis of IgA nephropathy (IgAN)-particularly with respect to galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1)-has not been fully elucidated. METHODS: Saliva samples from 30 IgAN patients and 44 patients with chronic kidney disease (CKD) were subjected to analysis of P. gingivalis status via polymerase chain reaction using a set of P. gingivalis-specific primers. The associations between P. gingivalis presence and clinical parameters, including plasma Gd-IgA1, were analyzed in each group. RESULTS: Compared with the CKD group, the IgAN group demonstrated significantly higher plasma Gd-IgA1 levels (p < 0.05). Compared with the P. gingivalis-negative subgroup, the P. gingivalis-positive subgroup exhibited significantly higher plasma Gd-IgA1 levels in both IgAN and CKD patients (p < 0.05). Additionally, among IgAN patients, the P. gingivalis-positive subgroup displayed significantly higher plasma Gd-IgA1 and urine protein levels, compared with the P. gingivalis-negative subgroup (p < 0.05). With respect to renal biopsy findings, the frequencies of segmental glomerulosclerosis and tubular atrophy/interstitial fibrosis were significantly greater in the P. gingivalis-positive subgroup than in the P. gingivalis-negative subgroup, according to the Oxford classification of IgAN (p < 0.05). CONCLUSION: Our findings suggest an association between the presence of P. gingivalis in the oral cavity and the pathogenesis of IgAN, mediated by increased levels of Gd-IgA1.

    DOI: 10.1007/s10157-023-02411-4

    PubMed

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  • Inhibitory Effect of Adsorption of Streptococcus mutans onto Scallop-Derived Hydroxyapatite. 国際誌

    Momoko Usuda, Mariko Kametani, Masakazu Hamada, Yuto Suehiro, Saaya Matayoshi, Rena Okawa, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano, Tatsuya Akitomo, Chieko Mitsuhata, Kazuya Koumoto, Keiko Kawauchi, Takahito Nishikata, Masatoshi Yagi, Toshiro Mizoguchi, Koki Fujikawa, Taizo Taniguchi, Kazuhiko Nakano, Ryota Nomura

    International journal of molecular sciences   24 ( 14 )   2023年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Hydroxyapatite adsorbs various substances, but little is known about the effects on oral bacteria of adsorption onto hydroxyapatite derived from scallop shells. In the present study, we analyzed the effects of adsorption of Streptococcus mutans onto scallop-derived hydroxyapatite. When scallop-derived hydroxyapatite was mixed with S. mutans, a high proportion of the bacterial cells adsorbed onto the hydroxyapatite in a time-dependent manner. An RNA sequencing analysis of S. mutans adsorbed onto hydroxyapatite showed that the upregulation of genes resulted in abnormalities in pathways involved in glycogen and histidine metabolism and biosynthesis compared with cells in the absence of hydroxyapatite. S. mutans adsorbed onto hydroxyapatite was not killed, but the growth of the bacteria was inhibited. Electron microscopy showed morphological changes in S. mutans cells adsorbed onto hydroxyapatite. Our results suggest that hydroxyapatite derived from scallop shells showed a high adsorption ability for S. mutans. This hydroxyapatite also caused changes in gene expression related to the metabolic and biosynthetic processes, including the glycogen and histidine of S. mutans, which may result in a morphological change in the surface layer and the inhibition of the growth of the bacteria.

    DOI: 10.3390/ijms241411371

    PubMed

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  • Eruption cyst caused by congenital tooth in low birth weight infant

    Eri Yoshida, Kana Goto, Daiki Matsuoka, Yukiko Miyai, Haruka Asaumi, Keiko Tabata, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Pediatric Dental Journal   2023年7月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/j.pdj.2023.06.004

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  • 口腔内のcnm遺伝子陽性S.mutansとIgA腎症患者の糖鎖異常IgA沈着の関連性

    三崎 太郎, 仲 周平, 鈴木 仁, 李 明峰, 青木 良輔, 長澤 康行, 松岡 大貴, 伊藤 誓悟, 野村 良太, 仲野 道代, 鈴木 祐介, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   65 ( 3 )   271 - 271   2023年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • 腎炎のあたらしい"モデル動物"の開発 ラットおよびマウスを用いた口腔細菌のIgA腎症発症への影響の検討

    野村 良太, 長澤 康行, 三崎 太郎, 仲 周平, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   65 ( 3 )   210 - 210   2023年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • 口腔内のcnm遺伝子陽性S.mutansとIgA腎症患者の糖鎖異常IgA沈着の関連性

    三崎 太郎, 仲 周平, 鈴木 仁, 李 明峰, 青木 良輔, 長澤 康行, 松岡 大貴, 伊藤 誓悟, 野村 良太, 仲野 道代, 鈴木 祐介, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   65 ( 3 )   271 - 271   2023年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • 腎炎のあたらしい"モデル動物"の開発 ラットおよびマウスを用いた口腔細菌のIgA腎症発症への影響の検討

    野村 良太, 長澤 康行, 三崎 太郎, 仲 周平, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   65 ( 3 )   210 - 210   2023年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • 進行性骨化性線維異形成症の小児において口腔底粘膜に腫脹を認めた1例

    平野 慶子, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   223 - 223   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 小児におけるコラーゲン結合タンパク陽性Streptococcus mutans株の分布と齲蝕罹患との関係

    奥田 真琴, 又吉 紗綾, 東條 文和, 仲 周平, 仲野 道代, 野村 良太, 仲野 和彦

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   136 - 136   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 非アルコール性脂肪肝炎患者口腔内から分離したStreptococcus mutansの脂肪酸との結合に関する検討

    中野 聡大, 田畑 佳子, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   233 - 233   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 小児における歯周病重症化メカニズムの検討

    宮井 由記子, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   110 - 110   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • コラーゲン結合タンパクCumとヒトIgAの結合に関する分子生物学的検討

    松岡 大貴, 仲 周平, 後藤 花奈, 野村 良太, 仲野 和彦, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   135 - 135   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • Porphyromonas gulae線毛遺伝子多型とバイオフィルムへの影響

    吉田 翔, 稲葉 裕明, 野村 良太, 仲野 和彦, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 大会抄録号 )   231 - 231   2023年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 先行乳歯の交換期障害による萠出前の後継永久歯にう蝕を認めた1例

    平野 慶子, 宮井 由記子, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   62 - 62   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • シークエンス解析による造血幹細胞移植前後の口腔内細菌の同定

    森川 優子, 小川 ひかり, 後藤 花奈, 平野 慶子, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   66 - 67   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 非アルコール性脂肪肝炎患者口腔内由来Streptococcus mutansの脂肪酸結合能の評価

    田畑 佳子, 中野 聡大, 仲 周平, 稲葉 裕明, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   69 - 70   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • ホタテ貝由来アパタイトのStreptococcus mutansに対する齲蝕予防効果の分析

    臼田 桃子, 亀谷 茉莉子, 秋友 達哉, 末廣 雄登, 又吉 紗綾, 中野 将志, 光畑 智恵子, 仲 周平, 仲野 道代, 仲野 和彦, 野村 良太, 谷口 泰造, 藤川 幸樹, 溝口 敏郎, 八木 正敏

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   40 - 40   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 多嚢胞性脳軟化症患児口腔内における多数埋伏歯の1例

    仲 周平, 吉田 翔, 松三 友紀, 稲葉 裕朗, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   62 - 62   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 歯牙腫による下顎右側側切歯および犬歯の萠出不全を認めた1例

    後藤 花奈, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   63 - 63   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 先天性歯による萠出性嚢胞が疑われた1例

    中野 聡大, 田畑 佳子, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   64 - 64   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • Raine症候群患児に対して歯科的管理を行った1例

    松浦 沙久矢, 浅海 春華, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   64 - 64   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • Streptococcus mutansのコラーゲン結合タンパクCnmの構造解析

    松岡 大貴, 仲 周平, 稲葉 裕明, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   66 - 66   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • 小児の侵襲性歯周炎に関連する口腔細菌の抗菌薬耐性の分析

    宮井 由記子, 仲 周平, 仲野 道代

    小児歯科学雑誌   61 ( 地方会抄録号 )   67 - 68   2023年2月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本小児歯科学会  

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  • Possible association of fimA genotype of Porphyromonas gulae with the severity of periodontal disease and the number of permanent teeth in dogs. 国際誌

    So Shirahata, Naoki Iwashita, Rie Sasaki, Ryota Nomura, Masaru Murakami, Junya Yasuda, Hidemi Yasuda, Kuniyasu Nakajima, Hiroaki Inaba, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano, Jumpei Uchiyama, Tomoki Fukuyama

    Frontiers in veterinary science   10   1022838 - 1022838   2023年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Previous research has demonstrated that Porphyromonas gulae (P. gulae) significantly contributes to the development of periodontal disease in dogs. Porphyromonas gulae is divided into three subtypes according to the 41-kDa filamentous appendage (fimA), defined as types A, B, and C. This study aimed to elucidate the association between fimA type of P. gulae with the number of permanent teeth, reflecting the severity of periodontal disease. Two hundred twenty-five dogs were categorized by P. gulae fimA type as negative, type A dominant, type B dominant, and type C dominant. The stage of periodontal disease in P. gulae-positive dogs increased with age, particularly in type C dominant dogs. Correspondingly, the number of permanent teeth in P. gulae fimA type C-dominant dogs was significantly lower than that of P. gulae-negative dogs, suggesting there is a significant association between fimA type of P. gulae and the number of permanent teeth resulting from the development of periodontal disease.

    DOI: 10.3389/fvets.2023.1022838

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  • cnm-positive Streptococcus mutans is associated with galactose-deficient IgA in patients with IgA nephropathy. 国際誌

    Taro Misaki, Shuhei Naka, Hitoshi Suzuki, Mingfeng Lee, Ryosuke Aoki, Yasuyuki Nagasawa, Daiki Matsuoka, Seigo Ito, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Yusuke Suzuki, Kazuhiko Nakano

    PloS one   18 ( 3 )   e0282367   2023年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    The presence of Streptococcus mutans expressing Cnm protein encoded by cnm (cnm-positive S. mutans) in the oral cavity is associated with immunoglobulin A (IgA) nephropathy (IgAN). However, the precise mechanism by which cnm-positive S. mutans is involved in the pathogenesis of IgAN remains unclear. The present study evaluated glomerular galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1) to clarify the association between the presence of cnm-positive S. mutans and glomerular Gd-IgA1 in patients with IgAN. The presence of S. mutans and cnm-positive S. mutans was evaluated by polymerase chain reaction in saliva specimens from 74 patients with IgAN or IgA vasculitis. Immunofluorescent staining of IgA and Gd-IgA1 using KM55 antibody in clinical glomerular tissues was then performed. There was no significant association between the glomerular staining intensity of IgA and the positive rate of S. mutans. However, there was a significant association between the glomerular staining intensity of IgA and the positive rate of cnm-positive S. mutans (P < 0.05). There was also a significant association between the glomerular staining intensity of Gd-IgA1 (KM55) and the positive rate of cnm-positive S. mutans (P < 0.05). The glomerular staining intensity of Gd-IgA1 (KM55) was not associated with the positive rate of S. mutans. These results suggest that cnm-positive S. mutans in the oral cavity is associated with the pathogenesis of Gd-IgA1 in patients with IgAN.

    DOI: 10.1371/journal.pone.0282367

    PubMed

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  • Distribution of periodontopathic bacterial species between saliva and tonsils. 査読

    Ryota Nomura, Yasuyuki Nagasawa, Taro Misaki, Seigo Ito, Shuhei Naka, Mieko Okunaka, Maiko Watanabe, Kenzo Tsuzuki, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Odontology   111 ( 3 )   719 - 727   2022年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Periodontopathic bacteria cause an inflammatory disease localized in the periodontal tissue and are associated with various conditions in other body parts. The distribution of periodontopathic bacterial species in the tonsils is unknown, even though the tonsils are located close to the oral cavity, and inflammation of the tonsils causes various systemic diseases. We detected the major periodontopathic bacterial species residing in saliva and tonsil specimens from 25 subjects undergoing tonsillectomy. Nine of the ten major periodontopathic bacterial species were detected by polymerase chain reaction of tonsil specimens, among which Campylobacter rectus was the most common (80.0%), followed by Porphyromonas gingivalis (36.0%). The other seven types of periodontopathic bacterial species were distributed with 0% to 25.0% abundance in the tonsil specimens. C. rectus had a high detection rate in tonsil specimens (> 75.0%), regardless of whether it was detected in the corresponding saliva specimens. However, the detection rate for P. gingivalis in tonsil specimens was significantly higher in subjects with P. gingivalis-positive saliva (77.8%) than in those with P. gingivalis-negative saliva (6.3%; P < 0.001). Furthermore, 75.0% of P. gingivalis in tonsil specimens did not have the known fimA gene that encodes the 41-kDa filamentous appendage protein FimA, which is expressed on the cell surface of the bacteria. Our results suggest that certain periodontopathic bacterial species are detected in the tonsils either independently of or depending on their distribution in the oral cavity and may be involved in tonsil-related diseases.

    DOI: 10.1007/s10266-022-00776-8

    PubMed

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  • 乳歯の早期脱落が認められた小児の口腔内細菌における抗菌薬耐性の検討

    宮井 由記子, 仲 周平, 仲野 道代

    岡山歯学会雑誌   41 ( 2 )   61 - 62   2022年12月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:岡山歯学会  

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  • Streptococcus mutansコラーゲン結合タンパクCnmの構造および機能の検討

    松岡 大貴, 仲 周平, 後藤 花奈, 稲葉 裕明, 仲野 道代

    岡山歯学会雑誌   41 ( 2 )   62 - 62   2022年12月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:岡山歯学会  

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  • Characterization of protease from animal periodontal pathogen Porphyromonas gulae

    Alam Saki Urmi, Hiroaki Inaba, Sho Yoshida, Ryota Nomura, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Japanese Journal of Veterinary Research   70 ( 3-4 )   79 - 90   2022年11月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Porphyromonas gulae is an animal-derived oral microorganisms known also to be associated with periodontal disease in humans. We previously reported that P. gulae proteases are possible one of virulence factors related to adhesion and invasion of gingival epithelial cells, and host cell destruction. Here we attempted to characterize bacterial proteases associated with P. gulae. Both alkaline phosphatase and trypsin activity were identified in all examined P. gulae strains and P. gingivalis ATCC33277. Each of the P. gulae strains also showed proteolytic activity in cell extract and/or culture supernatant samples. In addition, there was a significant increase in protease activity level seen in living bacterial cells, dependent on cell number, while there were no significant differences regarding proteolytic activity among the P. gulae strains. The present results indicate that antipain and PMSF are effective inhibitors of P. gulae proteases as well as P. gingivalis. In addition, TLCK and leupeptin significantly inhibited proteolytic activity in a dose-dependent manner. On the other hand, AEBSF, ALLN, aprotinin, bestatin, chymostatin, E64, EDTA, pepstatin, and phosphoramidon showed no inhibitory effects, while those of KYT-1 and KYT-36, P. gingivalis gingipain-specific inhibitors, were negligible. These results suggest that both P. gulae and P. gingivalis produce and secrete trypsin-like serine proteases, while the structure of those proteases differ between the two bacteria.

    DOI: 10.14943/jjvr.70.3-4.79

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  • Cnm of Streptococcus mutans is important for cell surface structure and membrane permeability 査読

    Shuhei Naka, Daiki Matsuoka, Kana Goto, Taro Misaki, Yasuyuki Nagasawa, Seigo Ito, Ryota Nomura, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Frontiers in Cellular and Infection Microbiology   12   2022年9月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Frontiers Media SA  

    Streptococcus mutans, a Gram-positive facultative anaerobic bacterium, is a major pathogen of dental caries. The protein Cnm of S. mutans is involved in collagen binding, but its other biological functions are unknown. In this study, a Cnm-deficient isogenic mutant and a complementation strain were generated from a Cnm-positive S. mutans strain to help determine the properties of Cnm. Initially, comparison of the cell surface structure was performed by electron microscopy, which demonstrated that Cnm appears to be localized on the cell surface and associated with a protruding cell surface structure. Deep RNA sequencing of the strains revealed that the defect in Cnm caused upregulated expression of many genes related to ABC transporters and cell-surface proteins, while a few genes were downregulated. The amount of biofilm formed by the Cnm-defective strain increased compared with the parental and complemented strains, but the biofilm structure was thinner because of elevated expression of genes encoding glucan synthesis enzymes, leading to increased production of extracellular polysaccharides. Particular antibiotics, including bacitracin and chloramphenicol, had a lower minimum inhibitory concentration for the Cnm-defective strain than particular antibiotics, including bacitracin and chloramphenicol, compared with the parental and complemented strains. Our results suggest that S. mutans Cnm is located on the cell surface, gives rise to the observed protruding cell surface, and is associated with several biological properties related to membrane permeability.

    DOI: 10.3389/fcimb.2022.994014

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  • Simultaneous Presence of Campylobacter rectus and Cnm-Positive Streptococcus mutans in the Oral Cavity Is Associated with Renal Dysfunction in IgA Nephropathy Patients: 5-Year Follow-Up Analysis. 国際誌

    Taro Misaki, Shuhei Naka, Yasuyuki Nagasawa, Daiki Matsuoka, Seigo Ito, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Nephron   147 ( 3-4 )   1 - 10   2022年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    BACKGROUND: The simultaneous presence of Streptococcus mutans expressing the Cnm protein encoded by cnm (i.e., cnm-positive S. mutans) and Campylobacter rectus in the oral cavity has been associated with proteinuria in patients with IgA nephropathy (IgAN). OBJECTIVES: The present study evaluated the relationship between renal function and oral bacteria in patients with IgAN over 5 years of follow-up. METHODS: The presence of C. rectus and cnm-positive S. mutans in saliva samples of 117 patients with IgAN was initially evaluated by polymerase chain reaction. Patients were then divided into four groups according to the results of C. rectus and cnm-positive S. mutans detection: group A: C. rectus (-), cnm-positive S. mutans (-); group B: C. rectus (+), cnm-positive S. mutans (-); group C: C. rectus (-), cnm-positive S. mutans (+); and group D: C. rectus (+), cnm-positive S. mutans (+). Clinical characteristics were prospectively followed for 5 years. RESULTS: Serum creatinine levels were significantly higher in group D than in group A over 5 years of follow-up. Additionally, the proportion of patients with an estimated glomerular filtration rate <45 mL/min increased over time; it was significantly greater in group D than in group A over 5 years of follow-up. CONCLUSION: These results suggest that the simultaneous presence of C. rectus and cnm-positive S. mutans in the oral cavity is associated with renal dysfunction in IgAN patients.

    DOI: 10.1159/000525511

    PubMed

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  • Green tea catechins inhibit Porphyromonas gulae LPS-induced inflammatory responses in human gingival epithelial cells: Running title. 査読 国際誌

    Sho Yoshida, Hiroaki Inaba, Ryota Nomura, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Journal of oral biosciences   2022年6月

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    OBJECTIVES: To determine the anti-inflammatory effects of green tea catechins in immortalized human gingival epithelial cells (Ca9-22) stimulated with Porphyromonas gulae lipopolysaccharide (LPS). METHODS: Ca9-22 cells were incubated with P. gulae LPS (10 μg/ml) with or without green tea catechins, epigallocatechin-3-gallate (EGCg), epigallocatechin (EGC), epicatechin-3-gallate (ECG), and epicatechin (EC) (each at 50 μM), for 6 or 24 hours. Real-time polymerase chain reaction (PCR) and enzyme-linked immunosorbent assay were used to determine the induction of cyclooxygenase 2 (COX2), tumor necrosis factor alpha (TNF-ɑ), interleukin 6 (IL-6), and IL-8. Furthermore, the expression of toll-like receptors (TLRs) 2 and 4 was examined using real-time PCR and western blotting analysis, and phosphorylation of the p38 and ERK1/2 was examined using western blotting analysis. RESULTS: At the mRNA and protein levels, EGCg, EGC, ECG, and EC were found to significantly inhibit COX2, TNF-ɑ, IL-6, and IL-8. Furthermore, the levels of ERK1/2 and p38 phosphorylation induced by P. gulae LPS were decreased following the addition of each of the catechins, as well as TLR2 and 4 mRNA and protein. CONCLUSIONS: These findings indicate that green tea catechins are potent inhibitors of inflammatory responses induced by P. gulae LPS, and may also be useful for prevention and/or attenuation of periodontitis.

    DOI: 10.1016/j.job.2022.05.006

    PubMed

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  • Porphyromonas gingivalis経鼻投与によるIgA腎症モデルマウスの作製

    長澤 康行, 野村 良太, 三崎 太郎, 仲 周平, 伊藤 誓悟, 和唐 薫子, 楠 博, 山崎 博充, 新村 健, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   64 ( 3 )   243 - 243   2022年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • Porphyromonas gingivalis経鼻投与によるIgA腎症モデルマウスの作製

    長澤 康行, 野村 良太, 三崎 太郎, 仲 周平, 伊藤 誓悟, 和唐 薫子, 楠 博, 山崎 博充, 新村 健, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   64 ( 3 )   243 - 243   2022年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • cnm遺伝子陽性S.mutansとC.rectusの口腔内の存在は5年後のIgA腎症患者の腎機能増悪に関連する

    三崎 太郎, 塩崎 友里子, 伊藤 大介, 清水 吉貴, 鈴木 由美子, 仲 周平, 野村 良太, 長澤 康行, 伊藤 誓悟, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   64 ( 3 )   243 - 243   2022年5月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • Title IgA Nephropathy and Oral Bacterial Species Related to Dental Caries and Periodontitis. 国際誌

    Yasuyuki Nagasawa, Taro Misaki, Seigo Ito, Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    International journal of molecular sciences   23 ( 2 )   2022年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    A relationship between IgA nephropathy (IgAN) and bacterial infection has been suspected. As IgAN is a chronic disease, bacteria that could cause chronic infection in oral areas might be pathogenetic bacteria candidates. Oral bacterial species related to dental caries and periodontitis should be candidates because these bacteria are well known to be pathogenic in chronic dental disease. Recently, several reports have indicated that collagen-binding protein (cnm)-(+) Streptococcs mutans is relate to the incidence of IgAN and the progression of IgAN. Among periodontal bacteria, Treponema denticola, Porphyromonas gingivalis and Campylobacte rectus were found to be related to the incidence of IgAN. These bacteria can cause IgAN-like histological findings in animal models. While the connection between oral bacterial infection, such as infection with S. mutans and periodontal bacteria, and the incidence of IgAN remains unclear, these bacterial infections might cause aberrantly glycosylated IgA1 in nasopharynx-associated lymphoid tissue, which has been reported to cause IgA deposition in mesangial areas in glomeruli, probably through the alteration of microRNAs related to the expression of glycosylation enzymes. The roles of other factors related to the incidence and progression of IgA, such as genes and cigarette smoking, can also be explained from the perspective of the relationship between these factors and oral bacteria. This review summarizes the relationship between IgAN and oral bacteria, such as cnm-(+) S. mutans and periodontal bacteria.

    DOI: 10.3390/ijms23020725

    PubMed

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  • Relationship between IgA Nephropathy and Porphyromonas gingivalis; Red Complex of Periodontopathic Bacterial Species 査読

    Nagasawa Y, Nomura R, Misaki T, Ito S, Naka S, Wato K, Okunaka M, Watabe M, Fushimi K, Tsuzuki K, Matsumoto-Nakano M, Nakano K.

    22 ( 23 )   2021年12月

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  • Relationship between IgA Nephropathy and Porphyromonas gingivalis; Red Complex of Periodontopathic Bacterial Species. 国際誌

    Yasuyuki Nagasawa, Ryota Nomura, Taro Misaki, Seigo Ito, Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Mieko Okunaka, Maiko Watabe, Katsuya Fushimi, Kenzo Tsuzuki, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    International journal of molecular sciences   22 ( 23 )   2021年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    IgA nephropathy (IgAN) has been considered to have a relationship with infection in the tonsil, because IgAN patients often manifest macro hematuria just after tonsillitis. In terms of oral-area infection, the red complex of periodontal bacteria (Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis), Treponema denticol (T. denticola) and Tannerella forsythia (T. forsythia)) is important, but the relationship between these bacteria and IgAN remains unknown. In this study, the prevalence of the red complex of periodontal bacteria in tonsil was compared between IgAN and tonsillitis patients. The pathogenicity of IgAN induced by P. gingivalis was confirmed by the mice model treated with this bacterium. The prevalence of P. gingivalis and T. forsythia in IgAN patients was significantly higher than that in tonsillitis patients (p < 0.001 and p < 0.05, respectively). A total of 92% of tonsillitis patients were free from red complex bacteria, while only 48% of IgAN patients had any of these bacteria. Nasal administration of P. gingivalis in mice caused mesangial proliferation (p < 0.05 at days 28a nd 42; p < 0.01 at days 14 and 56) and IgA deposition (p < 0.001 at day 42 and 56 after administration). Scanning-electron-microscopic observation revealed that a high-density Electron-Dense Deposit was widely distributed in the mesangial region in the mice kidneys treated with P. gingivalis. These findings suggest that P. gingivalis is involved in the pathogenesis of IgAN.

    DOI: 10.3390/ijms222313022

    PubMed

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  • 成人期に腰椎圧迫骨折から診断に至った骨形成不全症の1例

    森本 栄作, 稲垣 兼一, 佐々木 恵里佳, 伊藤 慶彦, 藤澤 諭, 寺坂 友博, 原 孝行, 越智 可奈子, 三好 智子, 仲野 道代, 和田 淳

    日本内分泌学会雑誌   97 ( 2 )   520 - 520   2021年10月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本内分泌学会  

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  • Prognostic association of starvation-induced gene expression in head and neck cancer. 査読

    Hamada M, Inaba H, Nishiyama K, Yoshida S, Yura Y, Matsumoto-Nakano M, Uzawa N.

    11 ( 1 )   2021年9月

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    記述言語:英語  

    DOI: 10.1038/s41598-021-9

  • Prognostic association of starvation-induced gene expression in head and neck cancer. 国際誌

    Masakazu Hamada, Hiroaki Inaba, Kyoko Nishiyama, Sho Yoshida, Yoshiaki Yura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Narikazu Uzawa

    Scientific reports   11 ( 1 )   19130 - 19130   2021年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Autophagy-related genes (ARGs) have been implicated in the initiation and progression of malignant tumor promotion. To investigate the dynamics of expression of genes, including ARGs, head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) cells were placed under serum-free conditions to induce growth retardation and autophagy, and these starved cells were subjected to transcriptome analysis. Among the 21 starvation-induced genes (SIGs) located in the autophagy, cell proliferation, and survival signaling pathways, we identified SIGs that showed prominent up-regulation or down-regulation in vitro. These included AGR2, BST2, CALR, CD22, DDIT3, FOXA2, HSPA5, PIWIL4, PYCR1, SGK3, and TRIB3. The Cancer Genome Atlas (TCGA) database of HNSCC patients was used to examine the expression of up-regulated genes, and CALR, HSPA5, and TRIB3 were found to be highly expressed relative to solid normal tissue in cancer and the survival rate was reduced in patients with high expression. Protein-protein interaction analysis demonstrated the formation of a dense network of these genes. Cox regression analysis revealed that high expression of CALR, HSPA5, and TRIB3 was associated with poor prognosis in patients with TCGA-HNSCC. Therefore, these SIGs up-regulated under serum starvation may be molecular prognostic markers in HNSCC patients.

    DOI: 10.1038/s41598-021-98544-1

    PubMed

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  • 扁桃と口腔内の歯周病菌の一致率の検討

    長澤 康行, 野村 良太, 三崎 太郎, 仲 周平, 伊藤 誓悟, 和唐 薫子, 木田 有利, 名波 正義, 倉賀野 隆裕, 仲野 道代, 仲野 和彦

    日本腎臓学会誌   63 ( 4 )   494 - 494   2021年6月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(一社)日本腎臓学会  

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  • Efficacy of FimA antibody and clindamycin in silkworm larvae stimulated with Porphyromonas gulae. 国際誌

    Sho Yoshida, Hiroaki Inaba, Ryota Nomura, Masaru Murakami, Hidemi Yasuda, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Journal of oral microbiology   13 ( 1 )   1914499 - 1914499   2021年4月

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Objective: Porphyromonas gulae, a major periodontal pathogen in animals, possesses fimbriae that have been classified into three genotypes (A, B, C) based on the diversity of fimA genes encoding fimbrillin protein (FimA). P. gulae strains with type C fimbriae were previously shown to be more virulent than other types. In this study, we further examined the host toxicity mediated by P. gulae fimbriae by constructing recombinant FimA (rFimA) expression vectors for each genotype and raised antibodies to the purified proteins. Methods and Results: All larvae died within 204 h following infection with P. gulae type C at the low-dose infection, whereas type A and B did not. Among fimA types, the survival rates of the larvae injected with rFimA type C were remarkably decreased, while the survival rates of the larvae injected with rFimA type A and type B were greater than 50%. Clindamycin treatment inhibited the growth of type C strains in a dose-dependent manner, resulting in an increased rate of silkworm survival. Finally, type C rFimA-specific antiserum prolonged the survival of silkworm larvae stimulated by infection with P. gulae type C strain or injection of rFimA type C protein. Conclusion: These results suggested that type C fimbriae have high potential for enhancement of bacterial pathogenesis, and that both clindamycin and anti-type C rFimA-specific antibodies are potent inhibitors of type C fimbriae-induced toxicity. This is the first report to establish a silkworm infection model using P. gulae for toxicity assessment.

    DOI: 10.1080/20002297.2021.1914499

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  • Inhibitory effects of flavedo, albedo, fruits, and leaves of Citrus unshiu extracts on Streptococcus mutans. 国際誌

    Ryota Nomura, Jumpei Ohata, Masatoshi Otsugu, Rena Okawa, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Archives of oral biology   124   105056 - 105056   2021年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    OBJECTVES: Citrus unshiu has been shown to exhibit antimicrobial effects against citrus diseases. In the present study, C. unshiu was divided into flavedo, albedo, fruits, and leaves; the inhibitory effects of these extracts on Streptococcus mutans, a major pathogen of dental caries, were investigated. DESIGN: C. unshiu specimens were separated into flavedo, albedo, fruits, and leaves. First, pH values and polyphenol amounts in Citrus extracts were measured. In addition, Citrus extract was added to the bacterial suspensions of S. mutans MT8148, and inhibitory effects of C. unshiu extracts on MT8148 for antimicrobial activity, bacterial growth, and biofilm formation were analyzed. These assays were also performed using C. sinensis extracts. RESULTS: Among these extracts, albedo exhibited a pH value closest to neutral, while the fruits exhibited the most acidic pH value; the pH values significantly differed between these extracts (P < 0.05). In addition, the amounts of polyphenols were significantly higher in albedo than in other extracts (P < 0.001). All extracts showed inhibitory effects on MT8148 for antimicrobial activity, bacterial growth and biofilm formation. These inhibitory effects were significantly stronger in flavedo, albedo, and fruits, compared with leaves (P < 0.05). Furthermore, extracts of Citrus sinensis also showed inhibitory effects on S. mutans, although these effects were weaker than the effects of C. unshiu. CONCLUSION: These results suggest that extracts from C. unshiu fruits exhibit inhibitory effects on S. mutans, among which albedo may be especially useful for dental caries prevention due to its neutral pH and abundant polyphenols, in addition to its inhibitory effects.

    DOI: 10.1016/j.archoralbio.2021.105056

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  • Non-alcoholic steatohepatitis caused by oral bacteria 招待 査読

    Naka S, Matsumoto-Nakano M

    Pediatric Dental Journal   31 ( 1 )   11 - 16   2021年4月

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Streptococcus mutans induces IgA nephropathy-like glomerulonephritis in rats with severe dental caries. 国際誌

    Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Taro Misaki, Seigo Ito, Daiki Matsuoka, Yasuyuki Nagasawa, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Scientific reports   11 ( 1 )   5784 - 5784   2021年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    The mechanisms underlying immunoglobulin A nephropathy (IgAN), the most common chronic form of primary glomerulonephritis, remain poorly understood. Streptococcus mutans, a Gram-positive facultatively anaerobic oral bacterium, is a common cause of dental caries. In previous studies, S. mutans isolates that express Cnm protein on their cell surface were frequently detected in IgAN patients. In the present study, inoculation of Cnm-positive S. mutans in the oral cavities of 2-week-old specific-pathogen free Sprague-Dawley rats fed a high-sucrose diet for 32 weeks produced severe dental caries in all rats. Immunohistochemical analyses of the kidneys using IgA- and complement C3-specific antibodies revealed positive staining in the mesangial region. Scanning electron microscopy revealed a wide distribution of electron dense deposits in the mesangial region and periodic acid-Schiff staining demonstrated prominent proliferation of mesangial cells and mesangial matrix. These results suggest that IgAN-like glomerulonephritis was induced in rats with severe dental caries by Cnm-positive S. mutans.

    DOI: 10.1038/s41598-021-85196-4

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  • Roles of Porphyromonas gulae proteases in bacterial and host cell biology. 国際誌

    Alam Saki Urmi, Hiroaki Inaba, Ryota Nomura, Sho Yoshida, Naoya Ohara, Fumitoshi Asai, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Cellular microbiology   23 ( 8 )   e13312   2021年1月

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Porphyromonas gulae, an animal-derived periodontal pathogen, expresses several virulence factors, including fimbria, lipopolysaccharide (LPS), and proteases. We previously reported that its invasive efficiency was dependent on fimbriae types. In addition, P. gulae LPS increased inflammatory responses via toll-like receptors. The present study was conducted to investigate the involvement of P. gulae proteases in bacterial and host cell biology. P. gulae strains showed an ability to agglutinate mouse erythrocytes and also demonstrated coaggregation with Actinomyces viscosus, while the protease inhibitors antipain, PMSF, TLCK, and leupeptin diminished P. gulae proteolytic activity, resulting in inhibition of hemagglutination and coaggregation with A. viscosus. In addition, specific proteinase inhibitors were found to reduce bacterial cell growth. P. gulae inhibited Ca9-22 cell proliferation in a multiplicity of infection- and time-dependent manner. Additionally, P. gulae-induced decreases in cell contact and adhesion-related proteins were accompanied by a marked change in cell morphology from well spread to rounded. In contrast, inhibition of protease activity prevented degradation of proteins, such as E-cadherin, β-catenin, and focal adhesion kinase, and also blocked inhibition of cell proliferation. Together, these results indicate suppression of the amount of human proteins, such as γ-globulin, fibrinogen and fibronectin, by P. gulae proteases, suggesting that a novel protease complex contributes to bacterial virulence. This article is protected by copyright. All rights reserved.

    DOI: 10.1111/cmi.13312

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  • Porphyromonas gulae lipopolysaccharide elicits inflammatory responses through toll-like receptor 2 and 4 in human gingivalis epithelial cells. 査読 国際誌

    Hiroaki Inaba, Sho Yoshida, Ryota Nomura, Yukio Kato, Fumitoshi Asai, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Cellular microbiology   22 ( 12 )   e13254   2020年12月

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Porphyromonas gulae, a Gram-negative black-pigmented anaerobe, has been associated with periodontal disease in companion animals and its virulence has been attributed to various factors, including lipopolysaccharide (LPS), protease and fimbriae. Toll-like receptors (TLRs) recognise pathogen-associated molecular patterns, such as peptidoglycan, lipids, lipoproteins, nucleic acid and LPS. Following P. gulae infection, some inflammatory responses are dependent on both TLR2 and TLR4. In addition, a recent clinical study revealed that acute and persistent inflammatory responses enhance the expressions of TLR2 and TLR4 in the oral cavity. In this study, we investigated the interaction between P. gulae LPS and human gingivalis epithelial cells (Ca9-22 cells). P. gulae LPS was found to increase TLR2 and TLR4 mRNA expressions and protein productions, and enhanced inflammatory responses, such as COX2 , TNF-ɑ, IL-6 and IL-8. Stimulated Ca9-22 cells exhibited phosphorylation of ERK1/2 and p38, and their inhibitors diminished inflammatory responses, while knockdown of the TLR2 and/or TLR4 genes with small interfering RNA (siRNA) prevented inflammatory responses. Moreover, p38 and ERK1/2 phosphorylation was decreased in TLR2 and TLR4 gene knockdown cells. These findings suggest that P. gulae LPS activates p38 and ERK1/2 via TLR2 and TLR4, leading to inflammatory responses in human gingival epithelial cells.

    DOI: 10.1111/cmi.13254

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  • Intravenous administration of Streptococcus mutans induces IgA nephropathy-like lesions.

    Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Taro Misaki, Seigo Ito, Yasuyuki Nagasawa, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Clinical and experimental nephrology   24 ( 12 )   1122 - 1131   2020年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    BACKGROUND: IgA nephropathy (IgAN) is one of the most frequently occurring types of chronic glomerulonephritis. Previous analyses have revealed that a major pathogen of dental caries, Streptococcus mutans [which expresses collagen-binding protein (Cnm) on its surface], is involved in the pathogenesis of IgAN. METHODS: Cnm-positive S. mutans isolated from a patient with IgAN was intravenously administered to specific pathogen-free Sprague-Dawley rats to evaluate their kidney conditions. RESULTS: The urinary protein level of the S. mutans group reached a plateau at 30 days, with increased numbers of mesangial cells and an increased mesangial matrix. The numbers of rats with IgA-positive and/or C3-positive glomeruli were significantly greater in the S. mutans group than in the control group at 45 days (P < 0.05). Electron microscopy analyses revealed electron-dense depositions in the mesangial area among rats in the S. mutans group. There were significantly more CD68-positive cells (macrophages) in the glomeruli of the S. mutans group than in the glomeruli of the control group during the late phase (P < 0.05), similar to the findings in patients with IgAN. CONCLUSION: Our results suggested that intravenous administration of Cnm-positive S. mutans caused transient induction of IgAN-like lesions in rats.

    DOI: 10.1007/s10157-020-01961-1

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  • Potential involvement of Streptococcus mutans possessing collagen binding protein Cnm in infective endocarditis. 国際誌

    Ryota Nomura, Masatoshi Otsugu, Masakazu Hamada, Saaya Matayoshi, Noboru Teramoto, Naoki Iwashita, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Scientific reports   10 ( 1 )   19118 - 19118   2020年11月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Streptococcus mutans, a significant contributor to dental caries, is occasionally isolated from the blood of patients with infective endocarditis. We previously showed that S. mutans strains expressing collagen-binding protein (Cnm) are present in the oral cavity of approximately 10-20% of humans and that they can effectively invade human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Here, we investigated the potential molecular mechanisms of HUVEC invasion by Cnm-positive S. mutans. The ability of Cnm-positive S. mutans to invade HUVECs was significantly increased by the presence of serum, purified type IV collagen, and fibrinogen (p < 0.001). Microarray analyses of HUVECs infected by Cnm-positive or -negative S. mutans strains identified several transcripts that were differentially upregulated during invasion, including those encoding the small G protein regulatory proteins ARHGEF38 and ARHGAP9. Upregulation of these proteins occurred during invasion only in the presence of serum. Knockdown of ARHGEF38 strongly reduced HUVEC invasion by Cnm-positive S. mutans. In a rat model of infective endocarditis, cardiac endothelial cell damage was more prominent following infection with a Cnm-positive strain compared with a Cnm-negative strain. These results suggest that the type IV collagen-Cnm-ARHGEF38 pathway may play a crucial role in the pathogenesis of infective endocarditis.

    DOI: 10.1038/s41598-020-75933-6

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  • Identification and functional analysis of glutamine transporter in Streptococcus mutans 査読

    Morikawa Y, Morimoto S, Yoshida E, Naka S, Inaba H, Matsumoto-Nakano M

    Journal of Oral Microbiology   12 ( 1 )   2020年8月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1080/20002297.202

  • Identification and functional analysis of glutamine transporter in Streptococcus mutans. 国際誌

    Yuko Morikawa, Setsuyo Morimoto, Eri Yoshida, Shuhei Naka, Hiroaki Inaba, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Journal of oral microbiology   12 ( 1 )   1797320 - 1797320   2020年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Background: Streptococcus mutans, a biofilm-forming bacterium, possesses several transporters that function as import/export molecules. Among them, the PII protein family is composed of members that regulate glutamine synthesis in bacterial species. Objective: In this study, we characterized the function of the glutamine transporter in S. mutans MT8148. Methods: The SMU.732 gene, corresponding to glnP in S. mutans, is homologous to the glutamine transporter gene in Bacillus subtilis. We constructed a glnP-inactivated mutant strain (GEMR) and a complement strain (comp-GEMR) and evaluated their biological functions. Results: Growth of GEMR was similar in the presence and absence of glutamine, whereas the growth rates of MT8148 and comp-GEMR were significantly lower in the presence of glutamine as compared to its absence. Furthermore, biofilms formed by MT8148 and comp-GEMR were significantly thicker than that formed by GEMR, while the GEMR strain showed a significantly lower survival rate in an acidic environment than the other strains. Addition of n-phenyl-2-naphthylamine, used to label of the membrane, led to increased fluorescence intensity of MT8148 and GEMR, albeit that was significantly lower in the latter. Conclusions: These results suggest that glnP is associated with glutamine transport in S. mutans, especially the import of glutamine involved in biofilm formation.

    DOI: 10.1080/20002297.2020.1797320

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  • Author Correction: Inhibition of Porphyromonas gulae and periodontal disease in dogs by a combination of clindamycin and interferon alpha. 国際誌

    Ryota Nomura, Hiroaki Inaba, Hidemi Yasuda, Mitsuyuki Shirai, Yukio Kato, Masaru Murakami, Naoki Iwashita, So Shirahata, Sho Yoshida, Saaya Matayoshi, Junya Yasuda, Nobuaki Arai, Fumitoshi Asai, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Scientific reports   10 ( 1 )   7295 - 7295   2020年4月

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    記述言語:英語  

    An amendment to this paper has been published and can be accessed via a link at the top of the paper.

    DOI: 10.1038/s41598-020-63861-4

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  • Inhibitory effect of a mouth rinse formulated with chlorhexidine gluconate, ethanol, and green tea extract against major oral bacterial species. 査読

    Ryota Nomura, Hiroaki Inaba, Saaya Matayoshi, Sho Yoshida, Yuki Matsumi, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Journal of oral science   62 ( 2 )   206 - 211   2020年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Mouth rinses are a useful supplementary tool for the prevention of oral infectious diseases. Although the antimicrobial effects of mouth rinses have been investigated, there are few studies focusing on the comparison of the effects among various oral bacterial species. In the present study, the inhibitory effect of a commercial mouth rinse, "ConCoolF," and each of its major components, chlorhexidine gluconate, ethanol, and green tea extract, on multiple species of oral bacteria were investigated. Inhibition of bacterial growth was observed in all cariogenic streptococcal species with different genera, serotypes, and strains isolated from different countries when either the complete mouth rinse or chlorhexidine gluconate were used. However, no growth inhibition was observed when the bacteria were exposed to ethanol or green tea extract. Interestingly, growth inhibition was greatly reduced in non-cariogenic streptococci compared with cariogenic streptococci. In addition, both the mouth rinse and chlorhexidine gluconate inhibited the biofilms formed by both Streptococcus mutans (S. mutans) and Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis), among which the inhibitory effect against S. mutans was higher than that against P. gingivalis. These results suggest that a mouth rinse containing chlorhexidine gluconate, ethanol, and green tea extract, or chlorhexidine gluconate alone, exhibits antimicrobial activity against several oral bacteria species, having greater activity against pathogenic bacteria.

    DOI: 10.2334/josnusd.18-0483

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  • Inhibition of Porphyromonas gulae and periodontal disease in dogs by a combination of clindamycin and interferon alpha. 国際誌

    Ryota Nomura, Hiroaki Inaba, Hidemi Yasuda, Mitsuyuki Shirai, Yukio Kato, Masaru Murakami, Naoki Iwashita, So Shirahata, Sho Yoshida, Saaya Matayoshi, Junya Yasuda, Nobuaki Arai, Fumitoshi Asai, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Scientific reports   10 ( 1 )   3113 - 3113   2020年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Porphyromonas gulae is a major periodontal pathogen in dogs, which can be transmitted to their owners. A major virulence factor of P. gulae consists of a 41-kDa filamentous appendage (FimA) on the cell surface, which is classified into three genotypes: A, B, and C. Thus far, inhibition of periodontal disease in dogs remains difficult. The present study assessed the inhibitory effects of a combination of clindamycin and interferon alpha (IFN-α) formulation against P. gulae and periodontal disease. Growth of P. gulae was significantly inhibited by clindamycin; this inhibition had a greater effect on type C P. gulae than on type A and B isolates. In contrast, the IFN-α formulation inhibited the expression of IL-1β and COX-2 elicited by type A and B isolates, but not that elicited by type C isolates. Furthermore, periodontal recovery was promoted by the administration of both clindamycin and IFN-α formulation to dogs undergoing periodontal treatment; moreover, this combined treatment reduced the number of FimA genotypes in oral specimens from treated dogs. These results suggest that a combination of clindamycin and IFN-α formulation inhibit P. gulae virulence and thus may be effective for the prevention of periodontal disease induced by P. gulae.

    DOI: 10.1038/s41598-020-59730-9

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  • Oral Lactobacilli Related to Caries Status of Children with Primary Dentition. 査読 国際誌

    Jinthana Lapirattanakul, Ryota Nomura, Rena Okawa, Setsuyo Morimoto, Pornpen Tantivitayakul, Thaniya Maudcheingka, Kazuhiko Nakano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Caries research   54 ( 2 )   194 - 204   2020年

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    担当区分:最終著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Oral lactobacilli are members of a group of bacteria implicated in caries progression, although information regarding their transmission, colonization, and caries-associated species is not well established. This study isolated oral lactobacilli from a group of children with primary dentition for determination of Lactobacillus prevalence, detection of Streptococcus mutans, a major pathogen of caries initiation, and dental caries status of the children. Species of Lactobacillus isolates were determined from examination of 16S rDNA sequences. Subsequently, the most prevalent species was evaluated for involvement in caries status, and binding ability to type I collagen of all Lactobacillus isolates was determined in association with caries status. Multilocus sequence typing (MLST) of eleven loci was carried out to study strains of the predominant Lactobacillus sp. The detection of oral lactobacilli together with S. mutans was significantly associated with the highest dental caries indices, but there was no involvement of collagen-binding properties of Lactobacillus isolates in caries status. Lactobacillus fermentum was the most prevalent, and its presence was related to high scores of caries indices. MLST analysis of L. fermentum population could not specify a particular clone associated with caries status, but revealed sharing of identical L. fermentum strains among children in the same classrooms. Taken together, the data contributed useful information on the role of oral lactobacilli, in particular L. fermentum in dental caries.

    DOI: 10.1159/000506468

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  • Case of autoimmune neutropenia with severe marginal periodontitis 査読

    2019年12月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語  

  • Case of autoimmune neutropenia with severe marginal periodontitis 査読

    Setsuyo Morimoto, Keiko Hirano, Keiko Tabata, Haruka Asaumi, Yuko Morikawa, Yuki Matsumi, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano

    PEDIATRIC DENTAL JOURNAL   29 ( 3 )   138 - 145   2019年12月

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    担当区分:責任著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER  

    Early onset periodontitis is rarely seen in infants, though often leads to an acute and serious clinical course when encountered in such patients. Autoimmune neutropenia presents systemic and dental symptoms, as depressed resistance to bacterial infection is caused by a disorder that reduces the number of neutrophils. This disease can result in not only gingival inflammation but also destruction of periodontal tissues, such as attachment loss, alveolar bone absorption, and early tooth loss in primary as well as mixed dentition. Here, we report treatment of a child with marginal periodontitis from the age of 3 years-7 years 9 months. No systemic manifestations were noted until 3 years of age, thus the patient had never received a detailed examination or medication related to the disease. Following examinations at our department, we referred the patient to a pediatrician at our university hospital for possible systemic disease, who made a diagnosis of autoimmune neutropenia. Although administration of antibiotics and professional dental care were continued, neutrophil count was not increased and progressive periodontal destruction was observed. Extraction of teeth with poor prognosis was performed and a prosthetic strategy for the missing teeth developed. It is important to recognize that periodontitis along with autoimmune neutropenia can appear in infants, even though the incidence is quite low. Early detection and early treatment of this disease is necessary for delaying progression of periodontitis and optimal occlusal induction of permanent teeth. (C) 2019 Japanese Society of Pediatric Dentistry. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.pdj.2019.06.002

    Web of Science

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  • Specific strains of Streptococcus mutans, a pathogen of dental caries, in the tonsils, are associated with IgA nephropathy 査読

    Seigo Ito, Taro Misaki, Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Yasuyuki Nagasawa, Ryota Nomura, Masatoshi Otsugu, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano, Hiroo Kumagai, Naoki Oshima

    Scientific Reports   9 ( 1 )   2019年12月

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Springer Science and Business Media LLC  

    DOI: 10.1038/s41598-019-56679-2

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    その他リンク: http://www.nature.com/articles/s41598-019-56679-2

  • Identification and molecular characterization of Porphyromonas gulae fimA types among cat isolates. 査読 国際誌

    Iwashita N, Nomura R, Shirai M, Kato Y, Murakami M, Matayoshi S, Kadota T, Shirahata S, Ohzeki L, Arai N, Yasuda J, Yasuda H, Inaba H, Matsumoto-Nakano M, Nakano K, Asai F

    Veterinary microbiology   229   100 - 109   2019年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.vetmic.2018.12.018

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  • Adhesion and invasion of gingival epithelial cells by Porphyromonas gulae. 査読 国際誌

    Inaba H, Nomura R, Kato Y, Takeuchi H, Amano A, Asai F, Nakano K, Lamont RJ, Matsumoto-Nakano M

    PloS one   14 ( 3 )   e0213309   2019年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1371/journal.pone.0213309

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  • Relationship between Streptococcus mutans expressing Cnm in the oral cavity and non-alcoholic steatohepatitis: a pilot study. 査読 国際誌

    Shuichi Tonomura, Shuhei Naka, Keiko Tabata, Tasuku Hara, Kojiro Mori, Saiyu Tanaka, Yoshio Sumida, Kazuyuki Kanemasa, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Masafumi Ihara, Nobuyuki Takahashi, Kazuhiko Nakano

    BMJ open gastroenterology   6 ( 1 )   e000329   2019年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Background: Non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is a severe state of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), which is pathologically characterised by steatosis, hepatocyte ballooning, and lobular inflammation. Host-microbial interaction has gained attention as one of the risk factors for NASH. Recently, cnm-gene positive Streptococcus mutans expressing cell surface collagen-binding protein, Cnm (cnm-positive S. mutans), was shown to aggravate NASH in model mice. Here, we assessed the detection rate of cnm-positive S. mutans in oral samples from patients with NASH among NAFLD. Methods: This single hospital cohort study included 41 patients with NAFLD. NASH was diagnosed histologically or by clinical score. The prevalence of cnm-positive S. mutans, oral hygiene and blood tests, including liver enzymes, adipocytokines and inflammatory and fibrosis markers, were assessed in biopsy-proven or clinically suspected NASH among NAFLD. Results: Prevalence of cnm-positive S. mutans was significantly higher in patients with NASH than patients without NASH (OR 3.8; 95% CI 1.02 to 15.5). The cnm-positive S. mutans was related to decreased numbers of naturally remaining teeth and increased type IV collagen 7S level (median (IQR) 10.0 (5.0-17.5) vs 20.0 (5.0-25.0), p=0.06; 5.1 (4.0-7.9) vs 4.4 (3.7-5.3), p=0.13, respectively). Conclusions: Prevalence of cnm-positive S. mutans in the oral cavity could be related to fibrosis of NASH among NAFLD.

    DOI: 10.1136/bmjgast-2019-000329

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  • Dental management of unilateral multiple impacted primary teeth

    Yuki Matsumi, Yuko Morikawa, Eri Yoshida, Setsuyo Morimoto, Sho Yoshida, Tatsushi Matsumura, Seiji Iida, Yukiko Takashima, Shuhei Naka, Michiyo Matsumoto-Nakano

    PEDIATRIC DENTAL JOURNAL   28 ( 3 )   119 - 124   2018年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER SCIENCE BV  

    Impacted primary teeth can be caused by odontogenic tumors such as odontomas, cystic diseases such as dentigerous and eruption cysts, and fibrous hyperplasia of the gingiva, while elimination of those causes reportedly results in normal eruption of primary teeth. We describe the course of a child from the age of 1 year until 4 years 10 months who had primary tooth eruption failure and was treated with dental methods. Although primary teeth expected to spontaneously erupt were followed, there were several on the left side that remained unerupted. We performed a left maxillary and mandibular gingivectomy to closely examine the cause of eruption delay and tooth germ dislocation, as well as attempt to induce eruption of the primary teeth. Based on histopathological results, the diagnosis was fibroma. Surgical procedures did not result in clear improvement of eruption failure. In order to improve masticatory function and aesthetics, the child was fixed with an artificial denture for all primary teeth not expected to erupt. (C) 2018 Japanese Society of Pediatric Dentistry. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.pdj.2018.09.002

    Web of Science

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  • Campylobacter rectus in the Oral Cavity Correlates with Proteinuria in Immunoglobulin A Nephropathy Patients 査読

    Taro Misaki, Shuhei Naka, Kaoruko Wato, Rina Hatakeyama, Yasuyuki Nagasawa, Seigo Ito, Hiroaki Inaba, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano

    Nephron   139 ( 2 )   143 - 149   2018年5月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:S. Karger AG  

    Background: Periodontitis-related pathogens, such as Campylobacter or Treponema species, have recently been shown to be associated with immunoglobulin A nephropathy (IgAN). Some strains of Streptococcus mutans, a major pathogen of dental caries, harbour the cnm gene that encodes a collagen-binding protein (Cnm). This has also been demonstrated to be associated with urinary protein levels in IgAN patients. Objectives: The purpose of the present study was to analyse the association of IgAN with C. rectus, Treponema denticola and cnm-positive S. mutans in the oral cavity of humans. Methods: The presence of C. rectus, T. denticola and cnm-positive S. mutans strains in saliva samples of 117 IgAN patients and 56 healthy controls was evaluated by PCR, and the subjects' clinical parameters were analysed. Results: C. rectus was significantly more prevalent in the IgAN group than in the control group (p &lt
    0.05). The C. rectus-positive group was significantly associated with proteinuria in the IgAN group (p &lt
    0.05). In addition, the C. rectus-positive and cnm-positive S. mutans group was shown to be more closely associated with urinary protein levels than the other groups (p &lt
    0.0083). Conclusion: Our results suggest that harbouring C. rectus in the oral cavity could be associated with proteinuria in IgAN patients.

    DOI: 10.1159/000487103

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  • Cell cycle arrest and apoptosis induced by Porphyromonas gingivalis require Jun N-terminal protein kinase- and p53- mediated p38 activation in human trophoblasts 査読

    Hiroaki Inaba, Atsuo Amano, Richard J. Lamont, Yukitaka Murakami, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Infection and Immunity   86 ( 4 )   2018年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:American Society for Microbiology  

    Porphyromonas gingivalis, a periodontal pathogen, has been implicated as a causative agent of preterm delivery of low-birth-weight infants. We previously reported that P. gingivalis activated cellular DNA damage signaling pathways and ERK1/2 that lead to G1 arrest and apoptosis in extravillous trophoblast cells (HTR-8 cells) derived from the human placenta. In the present study, we further examined alternative signaling pathways mediating cellular damage caused by P. gingivalis. P. gingivalis infection of HTR-8 cells induced phosphorylation of p38 and Jun N-terminal protein kinase (JNK), while their inhibitors diminished both G1 arrest and apoptosis. In addition, heat shock protein 27 (HSP27) was phosphorylated through both p38 and JNK, and knockdown of HSP27 with small interfering RNA (siRNA) prevented both G1 arrest and apoptosis. Furthermore, regulation of G1 arrest and apoptosis was associated with p21 expression. HTR-8 cells infected with P. gingivalis exhibited upregulation of p21, which was regulated by p53 and HSP27. These results suggest that P. gingivalis induces G1 arrest and apoptosis via novel molecular pathways that involve p38 and JNK with its downstream effectors in human trophoblasts.

    DOI: 10.1128/IAI.00923-17

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  • Contributions of Streptococcus mutans Cnm and PA antigens to aggravation of non-alcoholic steatohepatitis in mice 査読

    Shuhei Naka, Rina Hatakeyama, Yukiko Takashima, Michiyo Matsumoto-Nakano, Ryota Nomura, Kazuhiko Nakano

    SCIENTIFIC REPORTS   6   36886   2016年11月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:NATURE PUBLISHING GROUP  

    Streptococcus mutans, a major pathogen of dental caries, can cause infective endocarditis after invading the bloodstream. Recently, intravenous administration of specific S. mutans strains was shown to aggravate non-alcoholic steatohepatitis (NASH) in a mouse model fed a high-fat diet. Here, we investigated the mechanism of this aggravation in a NASH mouse model by focusing on the S. mutans cell surface collagen-binding protein (Cnm) and the 190-kDa protein antigen (PA). Mice that were intravenously administered a S. mutans strain with a defect in Cnm (TW871CND) or PA (TW871PD) did not show clinical or histopathological signs of NASH aggravation, in contrast to those administered the parent strain TW871. The immunochemical analyses demonstrated higher levels of interferon-gamma and metallothionein expression in the TW871 group than in the TW871CND and TW871PD groups. Analysis of bacterial affinity to cultured hepatic cells in the presence of unsaturated fatty acids revealed that the incorporation rate of TW871 was significantly higher than those of TW871CND and TW871PD. Together, our results suggest that Cnm and PA are important cell surface proteins for the NASH aggravation caused by S. mutans adhesion and affinity for hepatic cells.

    DOI: 10.1038/srep36886

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  • Apple-and Hop-Polyphenols Inhibit Porphyromonas gingivalis-Mediated Precursor of Matrix Metalloproteinase-9 Activation and Invasion of Oral Squamous Cell Carcinoma Cells 査読

    Hiroaki Inaba, Motoyuki Tagashira, Tomomasa Kanda, Yukitaka Murakami, Atsuo Amano, Michiyo Matsumoto-Nakano

    JOURNAL OF PERIODONTOLOGY   87 ( 9 )   1103 - 1111   2016年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:AMER ACAD PERIODONTOLOGY  

    Background: Recent epidemiologic studies have revealed a significant association between periodontitis and oral squamous cell carcinoma (OSCC). Furthermore, periodontitis is markedly associated with orodigestive cancer mortality, whereas Porphyromonas gingivalis (Pg) infection has been identified as a specific and potentially independent microbial factor related to increased risk of orodigestive cancer death. The authors previously reported that Pg induced the precursor form of matrix metalloproteinase-9 (proMMP-9) production via proteinase-activated receptor (PAR)-related pathways, after which proMMP-9 was activated by gingipains to enhance cellular invasion of SAS cells. In the present study, effects of selected polyphenols as inhibitors of cellular invasion caused by Pg gingipains in SAS cells are examined.
    Methods: OSCC cells were infected with Pg strains including gingipain mutants. To evaluate effects of inhibitors: 1) apple polyphenol (AP); 2) hop bract polyphenol (HBP); 3) high-molecular-weight fractions of HBP (HMW-HBP); 4) low-molecular-weight fractions of HBP (LMW-HBP); 5) epigallocatechin gallate (EGCg); 6) KYT-1 (Arg-gingipain inhibitor); and KYT-36 (Lys-gingipain inhibitor) in combination are used. PAR2 and PAR4 mRNA expressions are examined using real-time reverse transcription polymerase chain reaction, and signaling pathways are evaluated by western blotting analysis.
    Results: KYT-1/KYT-36, AP, HBP, and HMW-HBP significantly inhibited PAR2 and PAR4 mRNA expressions, proMMP-9 activation, and cellular invasion. Furthermore, AP, HBP, and HMW-HBP reduced activation of heat shock protein 27 and Ets1 and nuclear translocation of nuclear factor-kappa B, whereas EGCg and LMW-HBP did not.
    Conclusion: These results suggest that AP, HBP, HMW-HBP are potent inhibitors of proMMP-9 activation and cellular invasion mediated with Pg in OSCC cells.

    DOI: 10.1902/jop.2016.160047

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  • Characterization of the dextran-binding domain in the glucan-binding protein C of Streptococcus mutans 査読

    Y. Takashima, K. Fujita, A. C. Ardin, K. Nagayama, R. Nomura, K. Nakano, M. Matsumoto-Nakano

    JOURNAL OF APPLIED MICROBIOLOGY   119 ( 4 )   1148 - 1157   2015年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:WILEY  

    Aims: Streptococcus mutans produces multiple glucan-binding proteins (Gbps), among which GbpC encoded by the gbpC gene is known to be a cell-surface-associated protein involved in dextran-induced aggregation. The purpose of the present study was to characterize the dextran-binding domain of GbpC using bioinformatics analysis and molecular techniques.
    Methods and Results: Bioinformatics analysis specified five possible regions containing molecular binding sites termed GB1 through GB5. Next, truncated recombinant GbpC (rGbpC) encoding each region was produced using a protein expression vector and five deletion mutant strains were generated, termed CDGB1 through CDGB5 respectively. The dextran-binding rates of truncated rGbpC that included the GB1, GB3, GB4 and GB5 regions in the upstream sequences were higher than that of the construct containing GB2 in the downstream region. In addition, the rates of dextran-binding for strains CDGB4 and CD1, which was entire gbpC deletion mutant, were significantly lower than for the other strains, while those of all other deletion mutants were quite similar to that of the parental strain MT8148. Biofilm structures formed by CDGB4 and CD1 were not as pronounced as that of MT8148, while those formed by other strains had greater density as compared to that of CD1.
    Conclusion: Our results suggest that the dextran-binding domain may be located in the GB4 region in the interior of the gbpC gene.
    Significance and Impact of the Study: Bioinformatics analysis is useful for determination of functional domains in many bacterial species.

    DOI: 10.1111/jam.12895

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  • Short communication: Distribution of Porphyromonas gulae fimA genotypes in oral specimens from dogs with mitral regurgitation 査読

    Mitsuyuki Shirai, Ryota Nomura, Yukio Kato, Masaru Murakami, Chihiro Kondo, Soraaki Takahashi, Yoshie Yamasaki, Michiyo Matsumoto-Nakano, Nobuaki Arai, Hidemi Yasuda, Kazuhiko Nakano, Fumitoshi Asai

    RESEARCH IN VETERINARY SCIENCE   102   49 - 52   2015年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER SCI LTD  

    Porphyromonas gulae, a suspected pathogen for periodontal disease in dogs, possesses approximately 41-kDa fimbriae (FimA) that are encoded by the fimA gene. In the present study, the association of fimA genotypes with mitral regurgitation (MR) was investigated. Twenty-five dogs diagnosed with MR (age range 6-13 years old, average 10.8 years) and 32 healthy dogs (8-15 years old, average 10.8 years) were selected at the participating clinics in a consecutive manner during the same time period. Oral swab specimens were collected from the dogs and bacterial DNA was extracted, then polymerase chain reaction analysis was performed using primers specific for each fimA genotype, with the dominant genotype determined. The rate for genotype C dominant specimens was 48.0% in the MR group, which was significantly higher than that in the control group (18.8%) (P &lt;0.05). These results suggest that P. gulae fimA genotype C is associated with MR. (C) 2015 Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.rvsc.2015.07.009

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  • Contribution of glucan-binding protein A to firm and stable biofilm formation by Streptococcus mutans 査読

    Y. Matsumi, K. Fujita, Y. Takashima, K. Yanagida, Y. Morikawa, M. Matsumoto-Nakano

    MOLECULAR ORAL MICROBIOLOGY   30 ( 3 )   217 - 226   2015年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:WILEY-BLACKWELL  

    Glucan-binding proteins (Gbps) of Streptococcus mutans, a major pathogen of dental caries, mediate the binding of glucans synthesized from sucrose by the action of glucosyltransferases (GTFs) encoded by gtfB, gtfC, and gtfD. Several stress proteins, including DnaK and GroEL encoded by dnaK and groEL, are related to environmental stress tolerance. The contribution of Gbp expression to biofilm formation was analyzed by focusing on the expression levels of genes encoding GTFs and stress proteins. Biofilm-forming assays were performed using GbpA-, GbpB-, and GbpC-deficient mutant strains and the parental strain MT8148. The expression levels of gtfB, gtfC, gtfD, dnaK, and groEL were evaluated by reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR). Furthermore, the structure of biofilms formed by these Gbp-deficient mutant strains was observed using confocal laser scanning microscopy (CLSM). Biofilm-forming assay findings demonstrated that the amount formed by the GbpA-deficient mutant strain (AD1) was nearly the same as that by the parental strain, while the GbpB- and GbpC-deficient mutant strains produced lower amounts than MT8148. Furthermore, RT-qPCR assay results showed that the expressions of gtfB, dnaK, and groEL in AD1 were elevated compared with MT8148. CLSM also revealed that the structure of biofilm formed by AD1 was prominently different compared with that formed by the parental strain. These results suggest that a defect in GbpA influences the expression of genes controlling biofilm formation, indicating its importance as a protein for firm and stable biofilm formation.

    DOI: 10.1111/omi.12085

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  • Variation of expression defects in cell surface 190-kDa protein antigen of Streptococcus mutans 査読

    Jinthana Lapirattanakul, Ryota Nomura, Michiyo Matsumoto-Nakano, Ratchapin Srisatjaluk, Takashi Ooshima, Kazuhiko Nakano

    INTERNATIONAL JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY   305 ( 3 )   383 - 391   2015年5月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER GMBH, URBAN & FISCHER VERLAG  

    Streptococcus mutans, which consists of four serotypes, c, e, f, and k, possesses a 190-kDa cell surface protein antigen (PA) for initial tooth adhesion. We used Western blot analysis to determine PA expression in 750 S. mutans isolates from 150 subjects and found a significantly higher prevalence of the isolates with PA expression defects in serotypes f and k compared to serotypes c and e. Moreover, the defect patterns could be classified into three types; no PA expression on whole bacterial cells and in their supernatant samples (Type N1), PA expression mainly seen in supernatant samples (Type N2), and only low expression of PA in the samples of whole bacterial cells (Type W). The underlying reasons for the defects were mutations in the gene encoding PA as well as in the transcriptional processing of this gene for Type N1, defects in the sortase gene for Type N2, and low mRNA expression of PA for Type W. Since cellular hydrophobicity and phagocytosis susceptibility of the PA-defective isolates were significantly lower than those of the normal expression isolates, the potential implication of such defective isolates in systemic diseases involving bacteremia other than dental caries was suggested. Additionally, multilocus sequence typing was utilized to characterize S. mutans clones that represented a proportion of isolates with PA defects of 65-100%. Therefore, we described the molecular basis for variation defects in PA expression of S. mutans. Furthermore, we also emphasized the strong association between PA expression defects and serotypes f and k as well as the clonal relationships among these isolates. (C) 2015 Elsevier GmbH. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.ijmm.2015.03.001

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  • Contribution of the Interaction of Streptococcus mutans Serotype k Strains with Fibrinogen to the Pathogenicity of Infective Endocarditis 査読

    Ryota Nomura, Masatoshi Otsugu, Shuhei Naka, Noboru Teramoto, Ayuchi Kojima, Yoshinori Muranaka, Michiyo Matsumoto-Nakano, Takashi Ooshima, Kazuhiko Nakano

    INFECTION AND IMMUNITY   82 ( 12 )   5223 - 5234   2014年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:AMER SOC MICROBIOLOGY  

    Streptococcus mutans, a pathogen responsible for dental caries, is occasionally isolated from the blood of patients with bacteremia and infective endocarditis (IE). Our previous study demonstrated that serotype k-specific bacterial DNA is frequently detected in S. mutans-positive heart valve specimens extirpated from IE patients. However, the reason for this frequent detection remains unknown. In the present study, we analyzed the virulence of IE from S. mutans strains, focusing on the characterization of serotype k strains, most of which are positive for the 120-kDa cell surface collagen-binding protein Cbm and negative for the 190-kDa protein antigen (PA) known as SpaP, P1, antigen I/II, and other designations. Fibrinogen-binding assays were performed with 85 clinical strains classified by Cbm and PA expression levels. The Cbm(+)/PA(-) group strains had significantly higher fibrinogen-binding rates than the other groups. Analysis of platelet aggregation revealed that SA31, a Cbm(+)/PA(-) strain, induced an increased level of aggregation in the presence of fibrinogen, while negligible aggregation was induced by the Cbm-defective isogenic mutant SA31CBD. A rat IE model with an artificial impairment of the aortic valve created using a catheter showed that extirpated heart valves in the SA31 group displayed a prominent vegetation mass not seen in those in the SA31CBD group. These findings could explain why Cbm(+)/PA(-) strains are highly virulent and are related to the development of IE, and the findings could also explain the frequent detection of serotype k DNA in S. mutans-positive heart valve clinical specimens.

    DOI: 10.1128/IAI.02164-14

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  • Identification and Functional Analysis of an Ammonium Transporter in Streptococcus mutans 査読

    Arifah Chieko Ardin, Kazuyo Fujita, Kayoko Nagayama, Yukiko Takashima, Ryota Nomura, Kazuhiko Nakano, Takashi Ooshima, Michiyo Matsumoto-Nakano

    PLOS ONE   9 ( 9 )   e107569   2014年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:PUBLIC LIBRARY SCIENCE  

    Streptococcus mutans, a Gram-positive bacterium, is considered to be a major etiologic agent of human dental caries and reported to form biofilms known as dental plaque on tooth surfaces. This organism is also known to possess a large number of transport proteins in the cell membrane for export and import of molecules. Nitrogen is an essential nutrient for Grampositive bacteria, though alternative sources such as ammonium can also be utilized. In order to obtain nitrogen for macromolecular synthesis, nitrogen-containing compounds must be transported into the cell. However, the ammonium transporter in S. mutans remains to be characterized. The present study focused on characterizing the ammonium transporter gene of S. mutans and its operon, while related regulatory genes were also analyzed. The SMU. 1658 gene corresponding to nrgA in S. mutans is homologous to the ammonium transporter gene in Bacillus subtilis and SMU. 1657, located upstream of the nrgA gene and predicted to be glnB, is a member of the PII protein family. Using a nrgA-deficient mutant strain (NRGD), we examined bacterial growth in the presence of ammonium, calcium chloride, and manganese sulfate. Fluorescent efflux assays were also performed to reveal export molecules associated with the ammonium transporter. The growth rate of NRGD was lower, while its fluorescent intensity was much higher as compared to the parental strain. In addition, confocal laser scanning microscopy revealed that the structure of biofilms formed by NRGD was drastically different than that of the parental strain. Furthermore, transcriptional analysis showed that the nrgA gene was co-transcribed with the glnB gene. These results suggest that the nrgA gene in S. mutans is essential for export of molecules and biofilm formation.

    DOI: 10.1371/journal.pone.0107569

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  • Role of ABC transporter proteins in stress responses of Streptococcus mutans. 査読

    Nagayama K, Fujita K, Takashima Y, Ardin AC, Ooshima T, Matsumoto-Nakano M

    Oral health and dental management   13 ( 2 )   359 - 365   2014年6月

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  • Black pigmentation in primary dentition: Case report and literature review 査読

    Yukiko Takashima, Yuki Matsumi, Yoshie Yamasaki, Keiko Hirano, Kanako Yanagida, Kazuyo Fujita, Michiyo Matsumoto-Nakano

    Pediatric Dental Journal   24 ( 3 )   184 - 188   2014年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier Ltd  

    Black tooth staining is an extrinsic discoloration found in both primary and permanent dentition, and seen as dark pigmented lines extending to the gingival margin or an incomplete coalescence of dark dots that rarely extend beyond the cervical third of the crown. An association between black tooth staining and Actinomyces bacterial strains has been reported, while black-pigmented bacteria associated with such staining are known to be harbored in the oral cavity. Prevotella intermedia and Prevotella nigrescens are black-pigmented bacteria known to be dependent on the heme portion of hemoglobin as an iron source required for their growth. Recently, developments in molecular biological techniques have enabled rapid and easy detection of periodontopathic bacterial species using bacterial DNA extracted from oral specimens, such as plaque and saliva. Here, we report a case of black pigmentary deposition identified on all teeth of a 2-year-old girl, as well as the results of analysis of the distribution of oral bacteria in saliva and plaque specimens obtained from the patient using a molecular biological technique. In addition, a literature search found a case of disease related to the oral bacteria detected in our patient. We concluded that the bacteria detected in this case may have a strong relationship with black pigmentation, although the route of bacterial infection and cause of staining remain to be elucidated.

    DOI: 10.1016/j.pdj.2014.09.003

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  • Correlation of age with distribution of periodontitis-related bacteria in Japanese dogs 査読

    Norihiko Hirai, Mitsuyuki Shirai, Yukio Kato, Masaru Murakami, Ryota Nomura, Yoshie Yamasaki, Soraaki Takahashi, Chihiro Kondo, Michiyo Matsumoto-Nakano, Kazuhiko Nakano, Fumitoshi Asai

    Journal of Veterinary Medical Science   75 ( 7 )   999 - 1001   2013年

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    記述言語:英語  

    We analyzed the distribution of 11 periodontitis-related bacterial species in dental plaque collected from 176 Japanese dogs divided into young (less than 2 years of age), middle-aged (2-7 years of age) and elderly (more than 8 years of age) groups using a polymerase chain reaction method. Clinical examination revealed that no dogs in the young group were affected by periodontitis, whereas the rates for gingivitis and periodontitis were high in the middle-aged and elderly groups. In addition, the total numbers of bacterial species in the middle-aged and elderly groups were significantly greater than in the young group. Our findings suggest that age is an important factor associated with the distribution of periodontitis-related bacteria and periodontal conditions in dogs. © 2013 The Japanese Society of Veterinary Science.

    DOI: 10.1292/jvms.13-0041

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  • Distribution of periodontopathic bacterial species in dogs and their owners 査読

    Y. Yamasaki, R. Nomura, K. Nakano, S. Naka, M. Matsumoto-Nakano, F. Asai, T. Ooshima

    Archives of Oral Biology   57 ( 9 )   1183 - 1188   2012年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Objective: Presently, a large number of individuals consider their companion animals as family members and have close contact with them in daily life. The purpose of the present study was to analyze the distribution of periodontopathic bacterial species in oral specimens taken from dogs and their owners. Design: Dental plaque specimens were collected from 66 dogs and 81 members of 64 families who came to an animal clinic or dog training school in Okayama, Japan, in 2011. Bacterial DNA was extracted from each specimen and PCR analyses using primers specific for 11 periodontopathic species, Porphyromonas gingivalis, Porphyromonas gulae, Treponema denticola, Tannerella forsythia, Capnocytophaga ochracea, Capnocytophaga sputigena, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Campylobacter rectus, and Eikenella corrodens were performed. Results: P. gulae (71.2%), T. forsythia (77.3%), and C. rectus (66.7%) were frequently found in the dogs, whereas the detection rates of those species in humans were less frequent at 16.0%, 30.9%, and 21.0%, respectively. P. gulae was identified in 13 human subjects and each of their dogs was also positive for the species. Furthermore, E. corrodens and T. denticola in specimens obtained from dogs were correlated with their presence in specimens from owners who had close contact with them. Conclusions: These results suggest that several periodontopathic species could be transmitted between humans and their companion dogs, though the distribution of periodontopathic species in both is generally different. © 2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.archoralbio.2012.02.015

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  • Identification and characterization of a collagen-binding protein, Cbm, in Streptococcus mutans 査読

    R. Nomura, K. Nakano, S. Naka, H. Nemoto, K. Masuda, J. Lapirattanakul, S. Alaluusua, M. Matsumoto, S. Kawabata, T. Ooshima

    Molecular Oral Microbiology   27 ( 4 )   308 - 323   2012年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Streptococcus mutans, a major pathogen of dental caries, is occasionally isolated from the blood of patients with infective endocarditis. Bacterial attachment of exposed collagen tissue in the impaired endothelium is an important step in the onset of infective endocarditis. In our previous studies, some S. mutans strains were shown to possess collagen-binding activities and most of them had an approximately 120-kDa cell-surface collagen-binding protein called Cnm. However, several strains without Cnm proteins show collagen-binding properties. In the present study, another collagen-binding protein, Cbm, was characterized and its coding gene cbm was sequenced in these strains. The amino acid alignment in the putative collagen-binding domain of Cbm was shown to have approximately 80% identity and 90% similarity to the comparable region of Cnm. Cbm-deficient isogenic mutant strains constructed by insertional inactivation of the cbm gene, lacked collagen-binding properties, which were recovered in the complemented mutant. Analyses of a large number of clinical isolates from Japan, Thailand and Finland revealed that cbm-positive strains were present in all of these countries and that cnm-positive and cbm-positive strains were detected in the oral cavity of approximately 10 and 2% of systemically healthy subjects, respectively. In addition, cnm-positive strains were predominantly identified in the serotype f group, whereas cbm-positive strains were frequently detected in serotype k. These results suggest that Cbm as well as Cnm are major cell surface proteins of S. mutans associated with binding to type I collagen and predominantly identified in serotype k strains. © 2012 John Wiley &amp
    Sons A/S.

    DOI: 10.1111/j.2041-1014.2012.00649.x

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  • Diversity of Fimbrillin among Porphyromonas gulae Clinical Isolates from Japanese Dogs 査読

    Ryota Nomura, Mitsuyuki Shirai, Yukio Kato, Masaru Murakami, Kazuhiko Nakano, Norihiko Hirai, Tetsuya Mizusawa, Shuhei Naka, Yoshie Yamasaki, Michiyo Matsumoto-Nakano, Takashi Ooshima, Fumitoshi Asai

    JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE   74 ( 7 )   885 - 891   2012年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:JAPAN SOC VET SCI  

    Porphyromonas gulae, a gram-negative black-pigmented anaerobe, is a pathogen for periodontitis in dogs. An approximately 41-kDa fimbrial subunit protein (FimA) encoded by fimA is regarded as associated with periodontitis. In the present study, the fimA genes of 17 P. gulae strains were sequenced, and classified into two major types. The generation of phylogenetic trees based on the deduced amino acid sequence of FimA of P. gulae strains along with sequences from several strains of Porphyromonas gingivalis, a major cause of human periodontitis, revealed that the two types of FimA (types A and B) of P. gulae were similar to type I FimA and types II and III FimA of P. gingivalis, respectively. A PCR system for classification was established based on differences in the nucleotide sequences of the fimA genes. Analysis of 115 P. gulae-positive oral swab specimens from dogs revealed that 42.6%, 22.6%, and 26.1% of them contained type A, type B, and both type A and B fimA genes, respectively. Experiments with a mouse abscess model demonstrated that the strains with type B fimA caused significantly greater systemic inflammation than those with type A. These results suggest that the FimA proteins of P. gulae are diverse with two major types and that strains with type B fimA could be more virulent.

    DOI: 10.1292/jvms.11-0564

    Web of Science

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  • Successful application of atelocollagen for treatment of perforated teeth. 査読 国際誌

    Masuda K, Nakano K, Okawa R, Naka S, Matsumoto M, Ooshima T

    Journal of Clinical Pediatric Dentistry   36 ( 1 )   1 - 4   2011年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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  • Morphological examination of impacted tooth in maxillary lateral incisor region using computed tomography for consideration of treatment modalities 査読

    Sasaki H, Nakano K, Yamana A, Taniguchi N, Michikami I, Okawa R, Matsumoto M, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   20 ( 2 )   189 - 195   2010年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:一般社団法人 日本小児歯科学会  

    A 10Y2M-old girl was referred to our clinic by a general practitioner for consultation regarding an impacted supernumerary tooth identified in the maxillary left incisor region. Our intraoral examination revealed a maxillary left lateral incisor with a tubercle morphology, with slight swelling identified in the labial gingival area between the lateral incisor and primary canine. The dental age of the patient was calculated to be 1 year behind her chronological age based on root formation observed in orthopantomographs. X-ray photographic examinations revealed an impacted tooth on the labial side, with the root apex presumably directed into the palatal side. Computed tomography (CT) was used to produce three-dimensional reconstruction images in order to obtain morphological information for the impacted tooth, which had a tuberculate shape and an appearance that differed from that of the tooth on the opposite side, which showed a typical morphology of a lateral incisor. Periodical examinations were performed thereafter, which confirmed the developmental progress of the root formation of the impacted tooth. At 11Y8M, the tooth had emerged into the oral cavity and was extracted under local anesthesia. Based on this case, we concluded that effective use of CT is beneficial for consideration of treatment modalities in patients with an impacted tooth.

    DOI: 10.11411/pdj.20.189

    CiNii Article

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  • Radiolucent lesion identified in unerupted mandibular left first permanent molar: Case report and literature review 査読

    Yamana A, Nakano K, Sasaki H, Okawa R, Fujita K, Matsumoto M, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   20 ( 2 )   207 - 211   2010年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:一般社団法人 日本小児歯科学会  

    Intracoronal resorption in an unerupted developing tooth is rare and most lesions of this type are incidentally found in radiographs taken for other purposes. A 5Y10M-old girl was referred to our clinic by a general practitioner for detailed examination of radiolucency identified in the unerupted mandibular left first permanent molar. Intraoral examination revealed that the affected tooth was unerupted, while the radiographic findings demonstrated a wide radiolucent area in the coronal part of the affected molar, which extended close to the pulp. There were no signs or symptoms associated with the tooth at the first examination. At 6Y4M of age, the affected tooth had emerged into the oral cavity, though the patient reported no symptoms. We performed surgical removal of the gingival tissue corresponding to the occlusal surface of the tooth under infiltration anesthesia and macroscopic appearance showed the affected tooth to be intact. However, when the enamel of the affected tooth was removed, a hollow portion approximately 2 mm into the tooth with no pulp exposure was revealed. Calcium hydroxide was applied to the bottom of the cavity and restoration with cement was performed. Three months after treatment, the patient had no abnormal signs or symptoms. A literature search found 15 similar cases, in which mandibular dentition was more frequently affected than maxillary dentition. As for treatment modalities in those cases, conservative restoration was preferably selected, though extraction was inevitable in approximately half.

    DOI: 10.11411/pdj.20.207

    CiNii Article

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  • Defect of glucosyltransferases reduces platelet aggregation activity of Streptococcus mutans: Analysis of clinical strains isolated from oral cavities 査読

    N. Taniguchi, K. Nakano, R. Nomura, S. Naka, A. Kojima, M. Matsumoto, T. Ooshima

    ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY   55 ( 6 )   410 - 416   2010年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:PERGAMON-ELSEVIER SCIENCE LTD  

    Objective: Streptococcus mutans is a major pathogen of dental caries and occasionally isolated from the blood of patients with infective endocarditis, though the association of its cell-surface glucosyltransferases (GTFB, GTFC, and GTFD) with pathogenicity for infective endocarditis remains to be elucidated. In this study, we investigated the contribution of S. mutans GTFs to platelet aggregation and analysed GTF expression profiles in a large number of clinical oral isolates.
    Design: The platelet aggregation properties of GTF-defective isogenic mutant strains constructed from S. mutans reference strain MT8148 were evaluated using whole blood and platelet-rich plasma (PRP) taken from mice, as well as human PRP. In addition, GTF expression profiles for 396 S. mutans strains isolated from the oral cavities of 396 subjects were analysed by western blotting using antisera specific for each GTF.
    Results: The platelet aggregation activities of the GTF-defective isogenic mutants were significantly lower than that of MT8148 when added to a large number of cells. Western blotting revealed no strains without GTF expression, though six strains had alterations of GTFB and GTFC as compared to MT8148. PGR analyses indicated that the gtf3-gtfC region length was approximately 4.5 kb shorter in those strains as compared to MT8148. These were designated as "GTFBC-fusion" strains and they demonstrated lower levels of platelet aggregation.
    Conclusions: Our findings indicate that GTFs are associated with platelet aggregation. Although the clinical detection frequency of S. mutans strains with altered expressions is extremely low, GTFBC-fusion strains have activities similar to GTF-defective mutant strains. (C) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.archoralbio.2010.03.017

    Web of Science

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  • A case of gingival abscess identified in traumatized maxillary primary left central incisor fused with supernumerary tooth. 査読

    Kamakura N, Nakano K, Nagayama K, Kojima A, Takashima Y, Matsumoto M, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   2010年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.11411/pdj.20.99

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  • Molecular characterization of Streptococcus mutans strains containing the cnm gene encoding a collagen-binding adhesin 査読

    K. Nakano, R. Nomura, N. Taniguchi, J. Lapirattanakul, A. Kojima, S. Naka, P. Senawongse, R. Srisatjaluk, L. Gronroos, S. Alaluusua, M. Matsumoto, T. Ooshima

    ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY   55 ( 1 )   34 - 39   2010年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:PERGAMON-ELSEVIER SCIENCE LTD  

    Objective: Streptococcus mutans, known to be a major pathogen of dental caries, is also considered to cause infective endocarditis. its 120-kDa Cnm protein binds to type I collagen, which may be a potential virulence factor. In this study, we characterized S. mutans clinical strains focusing on the cnm gene encoding Cnm.
    Design: A total of 528 S. mutans strains isolated from Japanese, Finnish, and Thai subjects were investigated. Using molecular techniques, the distribution frequency of cnm-positive strains and location of the inserted cnm were analyzed. Furthermore, isogenic mutant strains were constructed by inactivation of the cnm gene, then their biological properties of collagen-binding and glucan-binding were evaluated. Southern hybridization of the genes encoding glucan-binding proteins was also performed.
    Results: The distribution frequency of cnm-positive strains from Thai subjects was 12%, similar to that previously reported for Japanese and Finnish subjects. Furthermore, the location of insertion of cnm was the same in all cnm-positive clinical isolates. As for the cnm-inactivated mutant strains constructed from 28 clinical isolates, their collagen-binding activity was negligible. in addition, glucan-binding activity in the crim-positive clinical isolates was significantly reduced and corresponded to a lack of gbpA encoding glucan-binding protein A.
    Conclusions: Our results indicate that strains with cnm genes, the most crucial factor for the collagen-binding property of S. mutans, are detectable at similar frequencies over several different geographic locations. In addition, the common properties of these strains are a high level of collagen-binding activity and tendency for a low level of glucan-binding activity. (C) 2009 Elsevier Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.archoralbio.2009.11.008

    Web of Science

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  • ラット動物実験系におけるサイクロデキストランのう蝕抑制効果の検討

    松本 道代, 藤田 一世, 稲垣 暁子, 永山 佳代子, 高島 由紀子, 仲 周平, 大嶋 隆

    小児歯科学雑誌   47 ( 2 )   415 - 415   2009年4月

  • Inverted maxillary second primary molar and permanent successor teeth: X-ray photographic evaluations. 査読

    Okawa R, Nakano K, Nomura R, Fujita K, Kamakura N, Matsumoto M, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   19 ( 1 )   123 - 129   2009年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.11411/pdj.19.123

    CiNii Article

    CiNii Books

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  • Idiopathic external root resorption with alveolar bone loss: Case report and microbiological evaluation. 査読

    Miyamoto E, Nakano K, Nomura R, Nemoto H, Inagaki S, Matsumoto M, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   19 ( 1 )   130 - 135   2009年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.11411/pdj.19.130

    CiNii Article

    CiNii Books

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  • Impacted primary second molar with odontoma identified in the adjacent tissue. 査読

    Kamakura N, Nakano K, Okawa R, Nomura R, Matsumoto M, Fukuda Y, Ooshima T

    Pediatric Dental Journal   19 ( 1 )   117 - 122   2009年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.11411/pdj.19.117

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  • Multiple sites of idiopathic internal resorption in primary dentition: A case report

    Michiyo Matsumoto-Nakano, Naofumi Kamakura, Eriko Miyamoto, Rena Okawa, Satoko Inagaki, Yasuo Fukuda, Takashi Ooshima

    Pediatric Dental Journal   19 ( 1 )   150 - 153   2009年

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    掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Elsevier BV  

    DOI: 10.1016/s0917-2394(09)70167-3

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  • Molecular interaction of alanine-rich and proline-rich regions of cell surface protein antigen PAc in Streptococcus mutans 査読

    Matsumoto-Nakano M, Tsuji M, Amano A, Ooshima T

    Oral Microbiology and Immunology   2008年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/j.1399-302X.2007.00421.x

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  • Role of bacteriocin immunity proteins in the antimicrobial sensitivity of Streptococcus mutans 査読

    Michiyo Matsumoto-Nakano, Howard K. Kuramitsu

    JOURNAL OF BACTERIOLOGY   188 ( 23 )   8095 - 8102   2006年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:AMER SOC MICROBIOLOGY  

    Bacteria utilize quorum-sensing systems to modulate environmental stress responses. The quorum-sensing system of Streptococcus mutans is mediated by the competence-stimulating peptide (CSP), whose precursor is encoded by the comC gene. A comC mutant of strain GS5 exhibited enhanced antimicrobial sensitivity to a wide variety of different agents. Since the addition of exogenous CSP did not complement this phenotype, it was determined that the increased tetracycline, penicillin, and triclosan sensitivities resulted from repression of the putative bacteriocin immunity protein gene, bip, which is located immediately upstream from comC. We further demonstrated that the inactivation of bip or smbG, another bacteriocin immunity protein gene present within the smb operon in S. mutans GS5, affected sensitivity to a variety of antimicrobial agents. Furthermore, both the bip and smbG genes were upregulated in the presence of low concentrations of antibiotics and were induced during biofilm formation relative to in planktonic cells. These results suggest, for the first time, that the antimicrobial sensitivity of a bacterium can be modulated by some of the putative bacteriocin immunity proteins expressed by the organism. The implications of these observations for the evolution of bacteriocin immunity protein genes as well as for potential new chemotherapeutic strategies are discussed.

    DOI: 10.1128/JB.00908-06

    Web of Science

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  • Cariogenicity of the probiotic bacterium Lactobacillus salivarius in rats 査読

    M Matsumoto, M Tsuji, H Sasaki, K Fujita, R Nomura, K Nakano, S Shintani, T Ooshima

    CARIES RESEARCH   39 ( 6 )   479 - 483   2005年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:KARGER  

    Probiotic bacteria such as lactobacilli and bifidobacteria are considered to be non-pathogenic and non-toxigenic on the basis of long years of safe usage. However, some species of lactobacilli are thought to be associated with the development of dental caries. The purpose of the present study was to examine the cariogenicity of the probiotic bacterium Lactobacillus salivarius in rats. Rats were divided into six groups, and infected with L. salivarius LS1952R and/or Streptococcus mutans MT8148R. L. salivarius LS1952R became established in the oral cavity of rats and induced significant level of dental caries even when infected for only 5 days from 18 to 22 days of age. In addition, the caries scores of rats superinfected with both Streptococcus mutans MT8148R and L. salivarius LS1952R from 18 days of age were significantly higher than those infected with either L. salivarius LS1952R or S. mutans MT8148R alone. Since strain LS1952R can adhere to saliva-coated hydroxyapatites, it is concluded that L. salivarius strain LS1952R possesses an inherent cariogenic activity following adherence to the tooth surface. Copyright (C) 2005 S. Karger AG, Basel.

    DOI: 10.1159/000088183

    Web of Science

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  • Inhibitory effects of cacao bean husk extract on plaque formation in vitro and in vivo 査読

    M Matsumoto, M Tsuji, J Okuda, H Sasaki, K Nakano, K Osawa, S Shimura, T Ooshima

    EUROPEAN JOURNAL OF ORAL SCIENCES   112 ( 3 )   249 - 252   2004年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BLACKWELL MUNKSGAARD  

    Cacao bean husk extract (CBH) has been shown to possess antibacterial and antiglucosyltransferase activities through its unsaturated fatty acids and epicatechin polymers, respectively. In the present study, the antiplaque activities of CBH were examined in vitro and in vivo. The extract inhibited the adherence of Streptococcus mutans MT8148 to saliva-coated hydroxyapatite and reduced the accumulation of artificial dental plaque by S. mutans MT8148 on orthodontic wire. The number of mutans streptococci in dental plaque was also significantly reduced when human dental plaque was exposed to CBH from 21 children at 37degreesC for 1 h. For the in vivo study, 28 volunteers aged 19-29 yr old rinsed their mouth with CBH, before and after each intake of food and before sleeping at night for 4 d without using other oral hygiene procedures. Plaque depositions and the numbers of mutans streptococci were reduced in the subjects, compared with rinsing with 1% ethanol alone. These results indicate that CBH possesses significant antiplaque activity in vitro and in vivo.

    DOI: 10.1111/j.1600-0722.2004.00134.x

    Web of Science

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書籍等出版物

  • 最新歯科衛生士教本 小児歯科 第2版

    ( 担当: 共著 ,  範囲: 小児歯科における患者との対応法)

    医歯薬出版  2021年3月 

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    総ページ数:211   記述言語:日本語

  • 臨床医のための小児歯科 BASIC & CASEBOOK 査読

    ( 担当: 共著)

    デンタルダイヤモンド社  2022年6月  ( ISBN:978-4-88510-536-4

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    総ページ数:273   記述言語:日本語 著書種別:教科書・概説・概論

  • 子どものみかたBOOK

    ( 担当: 共著 ,  範囲: 乳歯におけるランパントカリエスの特徴と治療法)

    デンタルダイヤモンド社  2021年3月  ( ISBN:978-4-88510-493-0

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    総ページ数:175   記述言語:日本語

  • 身近な臨床・これからの歯科医のための臨床講座

    ( 担当: 分担執筆)

    日本歯科医師会  2021年2月 

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    記述言語:日本語

  • 子どもの病気・けがNOTE

    ( 担当: 分担執筆 ,  範囲: その他の歯と口の病気(口内炎と正中離開))

    東山書房  2020年11月 

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    記述言語:中国語

  • 小児歯科はじめましょう

    ( 担当: 共著 ,  範囲: 小児の歯内療法)

    デンタルダイヤモンド社  2020年6月 

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    総ページ数:209   記述言語:日本語 著書種別:教科書・概説・概論

  • 小児救急治療ガイドライン

    ( 担当: 共著)

    2020年 

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    記述言語:日本語 著書種別:学術書

  • 乳幼児の口と歯の健診ガイド

    ( 担当: 共著 ,  範囲: 乳幼児の航空健康診査ポイント)

    医歯薬出版  2019年6月 

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    記述言語:日本語 著書種別:教科書・概説・概論

  • 小児歯科のレベルアップ&ヒント

    ( 担当: 共著 ,  範囲: 侵襲性歯周炎)

    デンタルダイヤモンド社  2019年6月  ( ISBN:978-4-88510-436-7

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    総ページ数:219  

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MISC

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講演・口頭発表等

  • Porphyromonas gulae 線毛のバイオフィルム形成能と遺伝子多型の関連

    吉田 翔, 稲葉 裕明, 仲野 道代

    第 42 回岡山⻭学会総会・学術集会  2021年11月28日 

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    会議種別:口頭発表(一般)  

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  • 乳⻭の早期脱落が認められた小児と健常児の口腔細菌叢の比較

    宮井 由記子, 仲 周平, 仲野 道代

    第 42 回岡山⻭学会総会・学術集会  2021年11月28日 

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    会議種別:口頭発表(一般)  

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共同研究・競争的資金等の研究

  • S. mutans コラーゲン結合タンパクに着目した IgA 腎症発症機構の解明

    研究課題/領域番号:23K09435  2023年04月 - 2026年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    仲 周平, 仲野 和彦, 仲野 道代

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    配分額:4550000円 ( 直接経費:3500000円 、 間接経費:1050000円 )

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  • 口腔バイオフィルム感染症制御法確立のための新規ターゲットタンパクの解析

    研究課題/領域番号:23H03115  2023年04月 - 2026年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(B)

    仲野 道代, 仲 周平, 稲葉 裕明

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    配分額:18460000円 ( 直接経費:14200000円 、 間接経費:4260000円 )

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  • S. mutans 口腔バイオフィルム形成における新たな分子シャペロンの機能解明

    研究課題/領域番号:22K10270  2022年04月 - 2025年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    八十川 友紀, 仲野 道代

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

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  • う蝕原性細菌のコラーゲン結合能に着目した低中所得国の全身疾患低減に向けた新戦略 国際共著

    研究課題/領域番号:21KK0160  2021年10月 - 2025年03月

    国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B))  国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B))

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    担当区分:研究分担者  資金種別:競争的資金

  • う蝕原性細菌のコラーゲン結合能に着目した低中所得国の全身疾患低減に向けた新戦略

    研究課題/領域番号:21KK0160  2021年10月 - 2025年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B))

    仲野 和彦, 野村 良太, 大川 玲奈, 又吉 紗綾, 仲野 道代, 仲 周平, 吉田 翔, 後藤 花奈

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    配分額:18980000円 ( 直接経費:14600000円 、 間接経費:4380000円 )

    う蝕原性細菌 Streptococcus mutansは、感染性心内膜炎の起炎菌としても知られている。近年、S. mutansには菌体表層にコラーゲン結合タンパクであるCnmを発現している株が存在し、感染性心内膜炎だけでなく脳血管疾患、腎疾患、非アルコール性脂肪肝炎などの全身疾患にも関与することが明らかになってきている。そこで、Cnm陽性S. mutansの保菌者の分布を詳細に分析することが、ある種の全身疾患の低減に役立つ可能性があるのではないかと考えた。本研究では、日本の各地域において口腔サンプルを採取してCnm陽性S. mutansの分布に関する調査を行うことにした。
    研究を行うに当たり、歯学部が存在する全国の国立大学に共同研究への参画を依頼したところ、10大学においてご協力いただけることになった。これらのうち、北海道大学、大阪大学、岡山大学、広島大学の4つの歯学部附属病院において患者の同意のもとで口腔サンプルの採取を開始し、現在までに143名の患者の口腔サンプルからS. mutansを分離した。これらの患者について、1名につき5株のS. mutansをピックアップしてゲノムDNAを抽出し、PCR法によりCnmをコードする遺伝子の検出を行った。その結果、Cnm陽性S. mutansの保菌者は143名のうち16名(11.2%)であり、各施設におけるCnm陽性S. mutansの検出率は北海道大学で25.0%(12名中3名)、大阪大学で9.1%(33名中3名)岡山大学で12.5%(32名中4名)広島大学で9.1%(66名中6名)であることが示された。

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  • 口腔細菌叢のメタゲノム解析による非アルコール性脂肪肝炎発症機序解明と新規予防戦略

    研究課題/領域番号:21K19604  2021年07月 - 2024年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的研究(萌芽)  挑戦的研究(萌芽)

    仲野 道代

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    配分額:6500000円 ( 直接経費:5000000円 、 間接経費:1500000円 )

    脂肪肝を呈する小児患者の口腔内細菌叢をメタゲノム解析によって分析し、高頻度に存在する歯周病原細菌および口腔レンサ球菌について網羅的に解析を行い、原因となる菌のスクリーニングを行う。本研究は、非アルコール性脂肪肝炎発症と口腔細菌との関連を明らかとし新たな予防法を確立することを目的とする。
    非アルコール性脂肪肝炎 (NASH)モデルマウスを用いた検討を行い、重度な NASH 患者からの口腔内から分離したS. mutans 株を頸静脈より投与し、菌投与後 16 週後に、体重の測定とマウス心臓から血液を採取、屠殺後、肝臓を摘出した。肝臓は,菌投与群では、菌非投与群のものと比較して明らかに肥大しており,菌投与群の肝重量は菌非投与群と比較して有意に高い値を示した。また、血液検査所見では、菌投与群では菌非投与群と比較して、総コレステロール、遊離コレステロール、LDL、HDL、コリンエステラーゼなどの値の上昇が認められ、脂質代謝異常が生じていることが明らかとなった。また、AST、ALT、ALP、LAP、鉄などの値の上昇も認められ、肝機能の障害が疑われた。さらに肝臓組織のヘマトキシリンエオジン染色像では,菌非投与群と比較して大滴性の脂肪沈着と局所の炎症性細胞の浸潤が顕著であった.一方で,菌非投与群では脂肪沈着はあったものの,小滴性の脂肪沈着であった.また,マッソントリクローム染色像では,菌投与群の肝実質の局所において青く染色された線維化像が観察されたが,菌非投与群では観察されなかった.
    以上の結果より、高脂肪食を与えインスリン抵抗性が生じているNASHモデルマウスに,NASH患者から分離されたS. mutans株を頸静脈より投与すると,NASHを発症することが明らかとなった.今後はこれらの発症メカニズムについて、S. mutansの保有する表層タンパクについて検討する予定である。

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  • 骨系統疾患患者の歯科病態の包括的検証と新規治療薬の歯科領域における評価

    研究課題/領域番号:21K10183  2021年04月 - 2024年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    大川 玲奈, 鋸屋 侑布子, 柿本 直也, 中元 崇, 仲野 道代

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    配分額:4030000円 ( 直接経費:3100000円 、 間接経費:930000円 )

    本研究は、骨系統疾患の歯科症状を定量評価することによって、歯科病態の発生メカニズムの解明につなげること、新規骨系統疾患治療法のヒトの顎骨や歯への影響を検討することを目的とし、低ホスファターゼ症患者とX連鎖性低リン血症性くる病患者のパノラマエックス線写真を収集し定量的に歯科病変を評価するとともに、脱落乳歯の提供を受け、石灰化について病理組織学的解析を行う。
    本学で設定したパノラマエックス線写真を用いた骨密度の年齢別基準値評価法を他施設でも応用するため、岡山大学でパノラマエックス線写真の収集を開始するとともに、幅広い年齢層に適応するため、16歳から20歳の健常な人のパノラマエックス線写真の収集を開始した。低ホスファターゼ症患者においては、多施設共同前向き観察研究として全国14施設から低ホスファターゼ症罹患患児50名のパノラマエックス線写真データを得た。また、X連鎖性低リン血症性くる病患者において、歯髄腔の面積を用いて象牙質形成不全の重症度を定量評価するため、健常児の歯髄腔面積の基準値設定を目的として、3歳から15歳の200名のパノラマエックス線写真データの読影を行っており、X連鎖性低リン血症性くる病患者において6名の患者のパノラマエックス線写真を得た。
    さらに、脱落乳歯の石灰化をラマン分析法にて解析を行うにあたり、健常乳歯を用いて測定条件を設定すると同時に、低ホスファターゼ症患者15名とX連鎖性低リン血症性くる病患者3名の乳歯を収集している。

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  • 歯周病レッドコンプレックスとIgA腎症発症進展機序解明と新規治療法の開発

    研究課題/領域番号:21K08242  2021年04月 - 2024年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    長澤 康行, 仲野 道代, 野村 良太

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

    IgA腎症患者の摘出扁桃において病原性の高いRedComplexに属する歯周病菌が有意に高く検出されることを見出した。また、この病原性の高い歯周病菌のひとつである、Porphyromonas gingivalisをマウスに継続して経鼻投与することで腎糸球体にIgAの沈着とメサンギウム基質の増生というIgA腎症特有の病変を惹起することが出来ることを見出だした。この一連の研究を、International Journal of Molecular Scienceに原著として報告した(Nagasawa Y, Nomura R, Misaki T, Ito S, Naka S, Wato K, Okunaka M, Watabe M, Fushimi K, Tsuzuki K, Matsumoto-Nakano M, Nakano K. Relationship between IgA Nephropathy and Porphyromonas gingivalis; Red Complex of Periodontopathic Bacterial Species. Int J Mol Sci. 2021 Dec 1;22(23):13022. doi: 10.3390/ijms222313022.)。また、この病原性の高い歯周病菌やコラーゲン結合能が上昇するcnm蛋白を持つ齲蝕菌のような口腔内細菌が、IgA腎症を惹起するメカニズムに関して現在想定しうる仮説とそれを支持するエビデンスを総説としてまとめ、International Journal of Molecular Scienceに報告した。これらの報告は、口腔内の衛生状態を良い状態で維持することがIgA腎症患者の予後を良くすることに寄与することを意味しており、大学内でも高く評価され、大学の公式ホームページにトピックスとして紹介された。さらに読売新聞にも同様の内容が紹介される記事が掲載され、広く公共に周知することになった。

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  • 口腔内細菌叢の網羅的解析による口腔粘膜障害への臨床アプローチ

    研究課題/領域番号:21K10185  2021年04月 - 2024年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    平野 慶子, 仲野 道代, 後藤 花奈

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    配分額:4160000円 ( 直接経費:3200000円 、 間接経費:960000円 )

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    小児がんの治療過程においては、造血幹細胞移植等の化学療法や放射線治療により免疫能が減少し口腔粘膜障害が多発する。また、口腔粘膜障害が消失後も口腔乾燥や粘膜の拘縮、口腔衛生状態の悪化等の原因で重度の齲蝕や歯肉炎を発症するが現在のところ、その原因は明らかとなっていない。本研究では、造血幹細胞移植を受ける小児患者から採取した移植前後の口腔検体を用いて口腔細菌叢における菌の定量化とその構成比、生物学的性状の比較検討ならびに病原タンパクの発現を検討する。
    岡山大学病院倫理審査委員会の承認を得て、保護者より同意が得られた造血幹細胞移植を受ける患児から移植前、移植1か月後、移植3か月後の口腔内検体として歯垢と唾液採取を行っている。
    現在のところ5名の患児の口腔内検体を採取しており、その内訳は移植3か月後までが3名、移植1か月後までが1名、移植前までが1名である。移植前の時点での平均年齢は8歳0か月(4歳4か月~11歳3か月)であった。移植3か月後までの口腔内検体を採取した3名の患児では口腔レンサ球菌数は経時的に増加が観察され、ミュ-タンスレンサ球菌は2名において移植3か月後でのみ認めた。乳酸桿菌は1名において移植1か月後のみに認められた。さらに分離できた菌を用いて各菌種の16SrRNAを増幅する特異的なプライマーを用いて、菌種の同定を行ったところ、歯周病病原細菌については移植前で、Capnocytophaga ochracea, Prevotella nigrescens, Campirobactr rectusを認め、移植1か月後にCapnocytophaga ochracea, Prevotella nigrescens 検出された。今後は、これらの菌についての病原性を検討する予定である。

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  • 膜タンパクをターゲットとした新たな口腔バイオフィルム制御法の確立

    研究課題/領域番号:20H03897  2020年04月 - 2023年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    仲野 道代, 仲 周平, 稲葉 裕明

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    配分額:17290000円 ( 直接経費:13300000円 、 間接経費:3990000円 )

    バイオフィルム形成は、細胞―細胞間情報伝達機構であるクオラムセンシングにより制御されており、必要な栄養素を取り込み不要な物質を排出する役割を持つ膜タンパクが関与しているがその詳細は不明である。本研究では、分子生物学的手法を駆使して齲蝕および歯周病の主要な起炎菌における膜タンパクの役割を明らかにすることを目的としている。
    S. mutans UA159 株のデータベースから、バイオフィルム形成に関連すると推定されるABC 膜輸送体をコードするSMU _1519 遺伝子を抽出した。SMU _1519の上流および下流領域、およびスペクチノマイシン耐性カセット断片をPCRにて増幅した。オーバーラップPCRで3つのDNA断片を連結させ、精製した。PCR産物をMT8148 株に形質転換することによりSMU _1519欠失変異株(Δ1519株)を作製し、実験に供試した。これらの菌株を対数増殖期まで培養し,RNA抽出を行い,RNA シーケンシングを行った。親株と比較して,遺伝子欠失変異株で2倍以上の変化を認めた遺伝子の解析を行った。その結果、MT8148株と比較し,SMU_1519 遺伝子欠失株において2倍以上発現が抑制した遺伝子は,ガラクトースやラクトースの代謝に関与するlac遺伝子を含む46種類であった。2倍以上発現が上昇した遺伝子は,アンモニアのトランスポーターであるnrgAを含む56種類であった。また,CSP添加によってSMU_1519 遺伝子の発現に変化は認めなかった。以上の結果から、SMU_1519 遺伝子欠失によって糖代謝に重要な役割を果たすlacオペロンの発現が抑制されることから,SMU_1519 遺伝子は増殖能やバイオフィルム形成に関与するシグナル伝達系によって制御されていることが示唆された。

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  • 歯科領域からの革新的治療法の開発を目指した口腔細菌に起因するIgA腎症の病態解明

    研究課題/領域番号:20K10225  2020年04月 - 2023年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    仲 周平, 仲野 和彦, 仲野 道代

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

    これまで、IgA腎症患者の唾液中にはコラーゲン結合能を有する Streptococcus mutans が高頻度で存在しており、これら菌株を保有する患者では、齲蝕経験歯数やタンパク尿の値が有意に高いことが報告されている。本研究の目的は、S. mutans の関連するIgA腎症発症のメカニズムを明らかにすることである。まず、IgA腎症患者より分離したコラーゲン結合能を有する S. mutans をラット頸静脈より投与し、15、30、45および60日後に尿を採取し、成分分析を行った。その結果、タンパク尿は菌投与後30日に非投与群と比較して有意に高い値を認めた。PAS染色像では、投与後30および45日の菌投与群では非投与群と比較してメサンギウム細胞および基質の増殖が認められた。一方で、投与後60日ではこれらの所見は認められなかった。さらに蛍光免疫染色像から、投与後30および45日の菌投与群のメサンギウム領域において、IgAおよびC3の有意な沈着が認められ、メサンギウム領域に高電子密度物質の沈着も確認された。ラット齲蝕モデルを用いた検討では、同 S. mutans 菌株をラット口腔内に定着させ齲蝕を誘発させた結果、菌投与群のプラークスコアと齲蝕スコアは非投与群と比較して有意に高い値を示した。菌投与群では、血尿陽性率は高く、PAS染色像では、メサンギウム細胞および基質の増殖が認められた。さらに蛍光免疫染色像では、メサンギウム領域において、IgAおよびC3の有意な沈着が確認された。
    これらの結果から、ラットモデルにおいてIgA腎症患者より分離した S. mutans を頸静脈より投与した場合は、一過性に IgA腎症様腎炎の発症を認め、ラット口腔内に同菌株を定着させ重度齲蝕を誘発した場合には、長期間ラット体内に持続的に菌が侵入することでIgA腎症用様腎炎が発症することが明らかとなった。

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  • IgA腎症患者の口腔検体と腎生検・摘出扁桃検体の歯科ー腎臓内科による学際的検討

    研究課題/領域番号:19K10098  2019年04月 - 2022年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    三崎 太郎, 仲野 和彦, 長澤 康行, 仲野 道代

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    配分額:4290000円 ( 直接経費:3300000円 、 間接経費:990000円 )

    本研究はIgA腎症をはじめとする慢性腎臓病と口腔内疾患との関連を検討する。
    ●う蝕原生細菌cnm 陽性S. mutans株とIgA腎症との関連についての病理的(扁桃)検討を行った。【目的】Cnm陽性S. mutansが扁桃を介してIgA腎症発症に関わっている可能性を検討する。【方法】腎生検で診断されたIgA腎症患者64人と慢性扁桃炎患者40人の摘出扁桃切片を, リコンビナントCnmタンパクを抗原として作製したポリクローナル抗体を用いて免疫染色し、Cnmの陽性率と臨床データとの関連を検討した。【結果】IgA腎症群では、慢性扁桃炎群と比較してCnm陽性S. mutansの陽性率が有意に高値であった(p < 0.05)。さらに、 IgA腎症群において、Cnm陽性S. mutans扁桃保菌者が非保菌者に比べ、有意に蛋白尿が多かった(p < 0.05)。【結論】扁桃におけるCnm陽性S .mutansはIgA腎症発症に関わり、患者の蛋白尿と関連する。以上はScientific Reports 2019に報告した。
    ●透析患者のう蝕の研究を行った。“透析患者の口腔状態は悪く、様々な全身の合併症に影響している”と仮説を立てた。【方法】透析患者80人と健常者76人のう蝕経験歯数(DMFT)と地域歯周疾患指数(CPI)を算定し、臨床データとの関連を検討した。【結果】透析患者群では健常群と比較して、DMFTが24以上である対象が有意に多かった (p < 0.05)。また、透析患者群内の比較では、DMFTが24以上の群では24以下の群と比べ脈圧差が有意に大きく(p < 0.05)、心疾患の既往率が高値であった (p < 0.05)。CPIは有意差を認めなかった。【結論】透析患者では健常者に比べてう蝕が重篤であり、そのことが動脈硬化と関連している可能性がある。以上はPLOS ONE2019に報告した。

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  • 歯周病菌P. gulaeの歯肉上皮細胞への感染成立と歯周病発症メカニズムの解明

    研究課題/領域番号:17K11612  2017年04月 - 2020年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    稲葉 裕明, 仲野 道代

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    配分額:4550000円 ( 直接経費:3500000円 、 間接経費:1050000円 )

    本研究費では、P. gulae 各線毛タイプ株のヒト歯肉上皮細胞株Ca9-22株への付着侵入をプロテクションアッセイを用いて解析した。全ての菌株が歯肉上皮細胞に付着するが、C型線毛保有の2株とB型線毛保有株1株のみ細胞内に侵入することが明らかにした。歯肉上皮細胞への付着侵入は、インテグリン&#593;5β1を介し、細胞膜のアクチン重合や代謝の調節因子だけでなく、菌が保有するプロテアーゼが関与することも明らかにした。C型線毛保有株の侵入能は、最も宿主傷害能を有するP. gingivalis II型線毛保有株と同等の侵入能を有することから、歯周病発症に関わる口腔細菌であることが示唆された。

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  • S.mutansのGbpC結合ドメインを用いた齲蝕免疫システムの構築

    研究課題/領域番号:17K11961  2017年04月 - 2020年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    高島 由紀子, 仲野 道代

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    配分額:4420000円 ( 直接経費:3400000円 、 間接経費:1020000円 )

    齲蝕病原性細菌 Streptococcus mutans には、グルカン結合タンパクC (GbpC) が存在し、これまでにバイオインフォマティクスの手法を用いて、GbpC をコードする gbpC の中央付近にグルカン結合領域が存在することを明らかとした。また、この領域を欠失させた S. mutans 株の上皮細胞への付着能が顕著に低下した。そこでこの結合領域をターゲットとする抗体を作製し、抗ペプチド抗体の作用についてラット齲蝕実験系において検討したところ、明確な齲蝕抑制効果が認められた。本研究の結果から、GbpCのグルカン結合領域の機能を抑制することによって齲蝕抑制が可能となることが示された。

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  • バイオフィルム感染症におけるABCトランスポーターの役割の探索と齲蝕予防への応用

    研究課題/領域番号:16H05550  2016年04月 - 2019年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    仲野 道代, 高島 由紀子, 平野 慶子, 稲葉 裕明

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    配分額:16900000円 ( 直接経費:13000000円 、 間接経費:3900000円 )

    本研究では、グルタミンABCトランスポーター(GlnP) 欠失変異株(ΔGlnP)を作製し、バイオフィルムを形成させたところ、親株と比較して明らかに構造が変化していた。また、ΔGlnPでは膜流動性が変化し、耐酸性も著しく低下していた。さらに、シグナル伝達システムに関連する遺伝子のうちComCを欠失させた変異株では、GlnPおよび GlnPとオペロンを形成しているPIIプロテインの発現は顕著に低下していた。以上のことより、ABCトランスポーターは物資の膜輸送の機能を有しバイオフィルム形成におけるシグナル伝達システムに強く関与し、バイフォフィルム形成に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。

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  • 小児期の抗癌剤使用に関する小児歯科領域からの提言作成を目指した臨床的・基礎的研究

    研究課題/領域番号:16K15838  2016年04月 - 2018年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究  挑戦的萌芽研究

    仲野 道代, 平野 慶子, 大川 玲奈

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    配分額:3380000円 ( 直接経費:2600000円 、 間接経費:780000円 )

    小児がん患者における永久歯胚形成障害は、歯胚形成時期における抗がん剤の投与が原因であると示唆されている。本研究では、臨床的および基礎的に抗癌剤による歯の形成への影響について検討を行った。乳幼児期に抗癌剤の投与を受けた患者39名のうち、永久歯胚形成障害が認められたのは32名で、短根が最も多く認められた。さらにマウス歯胚を用いて抗癌剤の影響を免疫組織学的に検討したところ、抗癌剤を作用させた歯胚ではサイトケラチンおよびビメンチンの発現が濃度依存的に減少していることが明らかとなった。以上の結果より、抗癌剤が上皮系および間葉系細胞に与える影響により形成障害を発症することが明らかとなった。

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  • 造血幹細胞移植治療が口腔内細菌叢に与える影響についての臨床および分子生物学的解析

    研究課題/領域番号:15K11366  2015年04月 - 2018年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    平野 慶子, 藤田 一世, 仲野 道代, 高島 由紀子

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    配分額:4810000円 ( 直接経費:3700000円 、 間接経費:1110000円 )

    悪性腫瘍の治療のために造血幹細胞移植を受けた小児において、口腔内の状況が悪化していることが多い。このことは、移植前後において口腔環境が激変することにより、口腔内の細菌叢が変化している可能性が示唆される。本研究では、移植前および移植後に唾液とプラークの採取しDNAを抽出し、それらを用いて代表的な口腔細菌についてPCR法を用いて検出した。その結果、口腔レンサ球菌の出現の頻度には大きな変化は無かったが、歯周病細菌においては術後に検出される菌の種類が増加していた。また乳酸桿菌は術後では9割の患者から検出された。以上の結果から、口腔内細菌叢は変化し、歯肉炎や重度の齲蝕を引き起こしている可能性が示された。

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  • 骨系統疾患に対する歯科からの基礎的・臨床的アプローチ

    研究課題/領域番号:15K11364  2015年04月 - 2018年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    大川 玲奈, 仲 周平, 仲野 和彦, 大薗 恵一, 北岡 太一, 仲野 道代

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    配分額:4680000円 ( 直接経費:3600000円 、 間接経費:1080000円 )

    本研究では、歯科症状を伴う骨系統疾患に対して臨床的、基礎的アプローチによって歯科的問題点の解決を試みた。骨形成不全症の全国実態調査では、約60%に象牙質形成不全を随伴すること、交換期障害を好発するが、その際の乳歯抜歯はビスホスホネート投与下であっても問題なく抜歯可能であることを明らかにした。低ホスファターゼ症については、乳歯だけではなく、永久歯においてもセメント質形成不全による早期脱落が起こることを報告した。また、生後1日目より酵素補充療法を受けている低ホスファターゼ症患者の脱落乳歯においてセメント質形成を確認した。さらに、モデルマウスへの遺伝子治療は歯科症状の改善に寄与することを示した。

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  • 分子疫学的手法を用いたグローバルスタンダードな重度う蝕リスク小児特定法の構築

    研究課題/領域番号:15H05300  2015年04月 - 2018年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    仲野 和彦, 仲 周平, 仲野 道代, 高島 由紀子, 大川 玲奈, 野村 良太, 藤田 一世, ラピラッタナクン ジンタナ

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    配分額:15730000円 ( 直接経費:12100000円 、 間接経費:3630000円 )

    タイ・バンコクの幼稚園・保育園施設において、3~4歳の園児から歯科健診時に唾液サンプルを採取し、Streptococcus mutansおよび乳酸桿菌の分離を行った。S. mutansに関しては、分子疫学的分類法の1つであるMultilocus sequence typing(MLST)法におけるデータを追加し、臨床所見との関連の可能性が示された。乳酸桿菌に関しては、Lactobacillus fermentum が重度う蝕と関連する可能性が示されたので、MLST法による分類を行ったところ、これまでの報告にない新たなSequence typeが同定された。

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  • 乳酸菌による新たな齲蝕発生メカニズムの解析

    研究課題/領域番号:15K11365  2015年04月 - 2017年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    藤田 一世, 仲野 道代

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    配分額:4810000円 ( 直接経費:3700000円 、 間接経費:1110000円 )

    近年、小児の唾液中に存在する齲蝕原性細菌であるStreptococcus mutans菌数は減少する傾向にあり、齲蝕があるにも関わらず、S. mutansが検出されない小児が増加している。そこで、口腔内には、乳幼児の重度齲蝕において重要な位置を占めていると考えられている乳酸菌群が存在することから、本研究の目的は、乳酸菌が関連する新たな齲蝕発生メカニズムを明らかにすることである。
    岡山大学医歯薬学総合研究科倫理委員会承認のもと、岡山大学病院小児歯科を受診された患児のうち、齲蝕を認める患児の唾液を採取し乳酸菌を分離同定し、その齲蝕原性について検討を加えた。結果として乳酸菌単独では、スクロース依存性平滑面付着能はS. mutansと比較すると低下していたが、S. mutansと混合して培養した場合、乳酸菌単一で培養した時と比較して、付着率が有意に高くなった。また、バイオフィルムの構造を観察したところ、乳酸菌は固層表面に単独でもバイオフィルムを形成することが可能であることが明らかとなった。さらに、乳酸菌単一のバイオフィルと比較して、S. mutansと混合して培養した場合のバイオフィルムでは、密度が高くなり、高さも増加していた。そこで、培養中に乳酸菌を作用させたS. mutansから全RNAを抽出し、Real-Time Reverse transcription PCRにより、S mutansのグルカン合成酵素であるグルコシルトランスフェラーゼの発現を調べたところ、乳酸菌を作用させていないS. mutansと比較して有意に発現の上昇が認められた。これらのことから、乳酸菌の存在は、齲蝕の発生に大きく関与している可能性が示唆された。
    一方で口腔内より分離された乳酸菌のコラーゲン結合を調べたところ、S. mutansと比較してコラーゲン結合能が顕著に高い乳酸菌の存在が明らかとなった。この結果は、乳酸菌の存在は、象牙質齲蝕の進行に関連している可能性が示唆された。

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  • 感染性心内膜炎リスク患者におけるアモキシシリンの有効性に関するエビデンスの構築

    研究課題/領域番号:25463177  2013年04月 - 2016年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    根本 浩利, 仲野 道代

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    配分額:5070000円 ( 直接経費:3900000円 、 間接経費:1170000円 )

    健常な母子から採取した唾液中のアモキシシリンおよびクリンダマイシンに耐性を示す口腔レンサ球菌の存在を検討した結果、その分布頻度はそれぞれ約 5%および約30%であった。また、これらの菌株は、他の抗菌薬に対しても耐性を示す傾向にあることが明らかとなった。さらに、これらの耐性菌株は母子間で伝播する可能性があることが明らかとなった。その後、心疾患罹患患者における調査を試みたが、採取検体数が十分ではなくエビデンスの構築にまでは至らなかった。今回の結果をもとに、今後の大規模調査につなげていく必要であると考えられる。

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  • 口腔バイオフィルム形成におけるバクテリオシン産生とABC膜輸送体の機能解析

    研究課題/領域番号:25463178  2013年04月 - 2016年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    永山 佳代子, 仲野 道代

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    配分額:5070000円 ( 直接経費:3900000円 、 間接経費:1170000円 )

    Streptococcus mutans は、他菌種に対して抗菌作用を持つバクテリオシンを産生し、生存する上で有利な環境を作り出す。本研究では、この菌の産生するバクテリオシンSmbAおよびNlmAの機能について検討を行った。SmbA 欠失変異株のバクテリオシン産生能はNlmA欠失変異株と比較して低く、バイオフィルム形成能はNlmA欠失変異株の方が低かった。さらに、Streptococcus gordoniiの存在下では、S. mutansのバクテリオシン産生量およびバイオフィルム形成量に変化が認められた。以上のことからバクテリオシン産生能がバイオフィルム形成に深く関与していることが示唆された。

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  • 伴侶動物からの歯周病原性細菌の伝播による歯周病悪化メカニズムの解明

    研究課題/領域番号:25670873  2013年04月 - 2015年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究  挑戦的萌芽研究

    野村 良太, 仲野 道代, 浅井 史敏

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    配分額:3770000円 ( 直接経費:2900000円 、 間接経費:870000円 )

    これまでに、犬とその飼い主との間の歯周病原性細菌の伝播に関する報告はほとんどない。本研究では、犬の主要な歯周病原性細菌として知られているPorphyromonas gulaeを含むいくつかの歯周病原性細菌種が、犬とその飼い主の両方から検出されることを示した。P. gulaeには約41kDaの線毛タンパクであるFimAが存在し、A、B、C型に分類される。このうちC型のFimAを保有するP. gulaeは、僧帽弁閉鎖不全症にも関与していることが示された。

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  • リコンビナーゼAを用いたリプレイスメントセラピーによる新規齲蝕抑制法の開発

    研究課題/領域番号:25670874  2013年04月 - 2015年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究  挑戦的萌芽研究

    仲野 道代(松本道代)

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    配分額:3770000円 ( 直接経費:2900000円 、 間接経費:870000円 )

    Streptococcus mutans は、表層に存在するグルカン合成素 (glucosyltransferase; GTF) から、粘着性のグルカンを合成し、グルカンを介し歯面に強固に付着する。これらGTFをコードするgtfBC遺伝子が RecombinaseA (RecA)の過剰発現によってリコンビネーションを生じることが明らかとなったため、本研究では、はじめにリコンビナントRecAを作製し、リコンビネーション株を人工的に作製した。さらにrRecAがGTFのプロモーター部分に結合することを明らかとした。本研究の結果は、rRecAを用いた齲蝕抑制物質の開発が可能であることを示唆している。

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  • S.mutansグルカン結合タンパクBの発現メカニズムと調節機構の解析

    研究課題/領域番号:24593089  2012年04月 - 2015年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    藤田 一世, 仲野 道代

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    配分額:5330000円 ( 直接経費:4100000円 、 間接経費:1230000円 )

    Streptococcus mutansの菌体表層タンパクの一つであるグルカン結合タンパクB (GbpB)をコードするgbpB遺伝子の上流に存在し、細胞形態決定遺伝子と推定されるmreC遺伝子およびmreD遺伝子を抽出し、GbpBとの発現の関連について検討を行った。mreC遺伝子、mreD遺伝子およびgbpB遺伝子は一つのオペロンとして機能している可能性が示唆された。さらにmreCおよびmreD遺伝子欠失株を作製し、gbpB遺伝子の発現量を親株と比較したところ、有意に低下していた。以上の結果は、mreC遺伝子とmreD遺伝子はgbpB遺伝子の発現に影響を与えている可能性が示唆された。

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  • S.mutansの膜タンパクが関連する新たなシグナル伝達システムの解明

    研究課題/領域番号:23390473  2011年04月 - 2014年03月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    仲野 道代, 藤田 一世, 大嶋 隆

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    配分額:19240000円 ( 直接経費:14800000円 、 間接経費:4440000円 )

    Streptococcus mutans のバイオフィルム形成において、口腔内の環境に適応するためにシグナル伝達システムが存在し、そのシステム中で膜タンパクが機能している。本研究では、栄養素であるアンモニウムイオンの取り込みについて検討した。Bacillus subtilis のアンモニウム輸送体をコードする nrgA 遺伝子と相同性が高い遺伝子 SMu1510 を抽出、その欠失変異株を作成し検討した。アンモニウムイオン存在下において欠失変異株は増殖能およびバイオフィルム形成が低下していたことから、SMu1510 は膜輸送に関与し、シグナル伝達システム関連遺伝子であることが明らかとなった。

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  • 人獣共通感染症としての犬歯周病に関する研究

    研究課題/領域番号:23658256  2011年 - 2013年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究  挑戦的萌芽研究

    浅井 史敏, 加藤 行男, 仲野 和彦, 仲野 道代

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    配分額:3770000円 ( 直接経費:2900000円 、 間接経費:870000円 )

    我々は犬歯周病の人獣共通感染症としての可能性ならびに全身疾患との関連性を明らかにすることを本研究の目的とした。家庭内で飼育されている犬から口腔スワブサンプルを採取し、PCR法により10種の人歯周病菌および1種の犬歯周病菌の存在の有無を解析した。P. gulaeは解析した100頭以上の犬のほとんどで検出された。P. gulaeについて線毛遺伝子(fimA)の配列を解析したところ、3タイプに分かれ、これらをA, B, C型と命名した。C型の毒性はA型およびB型よりも強力であった。P. gulaeのC型とある種の循環器疾患との相関が見出された。

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  • S. mutansクオラムセンシングにおけるリコンビナーゼ A の分子生物学的解析

    研究課題/領域番号:22592283  2010年 - 2012年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    稲垣 暁子, 大嶋 隆, 仲野 道代

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    配分額:4550000円 ( 直接経費:3500000円 、 間接経費:1050000円 )

    齲蝕病原性細菌Streptococcus mutansは、グルカン合成酵素 (GTF)を産生し、歯面に付着する。一方、リコンビナーゼ A (Recombinase A: RecA) は、遺伝子のリコンビネーションをおこすタンパクとして報告されている。本研究では、RecA のS. mutans のバイオフィルム形成における GTF への影響について検討を行った。RecA の過剰発現により、gtfB 遺伝子の 4235bp 下流とgtfC 遺伝子の 788bp 上流において、リコンビネーションが起こることが明らかとなった。この研究により、RecA は、S.mutansのバイオフィルム形成に関与していることが示唆された。

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  • 口腔バイオフィルムにおけるミュータンスレンサ球菌のシグナル伝達システムの解析

    研究課題/領域番号:20592399  2008年 - 2010年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    仲野 道代

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    配分額:4680000円 ( 直接経費:3600000円 、 間接経費:1080000円 )

    う蝕原性細菌Streptococcus mutansによるバイオフィルム形成は,クオラムセンシングシステムのもとで形成される.また,細菌の遺伝子のリコンビネーションや形質転換に関与するリコンビナーゼAはrecA遺伝子によってコードされている.S. mutansにおいて,recA遺伝子欠失変異株では表層タンパクのひとつであるグルカン合成酵素の発現が減少し,バイオフィルムの構造が変化したことから,recA 遺伝子がバイオフィルムの形成に関与しており,さらにクオラムセンシング関連遺伝子である可能性が示された。

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  • S. mutansグルカン結合タンパクBの発現と病原性に関する研究

    研究課題/領域番号:18592233  2006年 - 2007年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    仲野 道代

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    配分額:3830000円 ( 直接経費:3500000円 、 間接経費:330000円 )

    う蝕の主要な病原細菌であるStreptococcus mutansの菌体表層にはグルカン合成酵素(Glucosyltransferase: GTF)、高分子タンパク抗原(PAc)、およびグルカン結合タンパク(Glucan-bindingprotein: Gbp)が存在している。GbpにはこれまでのところGbpA、GbpB、GbpC、およびGbpDの4種類が報告されている。これまでにGbpAおよびGbpCの機能についてはスクロース依存性平滑面付着能に関与し、う蝕発生の病原因子であることが明らかとなっているが、GbpBの機能については、明らかとなっていなかったため、本研究ではその機能について検討することとした。まず、分子生物学的手法を用いて、各Gbpの発現を欠失させた株を作製し、その生物学的性状を親株と比較した。その結果、菌の増殖作用においては、他の菌株と比較して、GbpB欠失変異株では増殖速度は明らかに低下していた。またS.mutansのう蝕発生における最も重要な因子の一つである耐酸性についても、GbpB欠失変異株では明らかに低下していた。しかしながら、スクロース依存性平滑面付着能においてはGbpAおよびGbpC欠失変異株では低下が認められたものの、親株と比較してGbpB欠失変異株においてはほとんど変化が認められなかった。そこで菌の増殖に関与するレンサの長さについて調べたところ、他の菌株と比較して明らかに長くなっており、さらに電子顕微鏡により、菌の表層構造を調べたところ、他の菌と比較して、GbpB欠失変異株では表層構造がかなり不明瞭となっていた。以上のことより、GbpBが細胞壁を構成する成分の一つであり、菌の増殖および分裂に関与していることが明らかとなり、う蝕の発生機序におけるGbpBの機能を明確にすることができた。

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  • 植物ポリフェノールのう蝕抑制効果に関する分子生物学的解明

    研究課題/領域番号:15791205  2003年 - 2004年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 若手研究(B)  若手研究(B)

    仲野 道代

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    配分額:3600000円 ( 直接経費:3600000円 )

    現在,様々な植物中に含まれているポリフェノールがう蝕の発生を抑制することがいわれている。また,う蝕病原細菌Streptococcus mutans表層には様々なタンパクが存在している。我々はこのうちグルカン合成酵素(Glucosylltransferase:GTF)の機能ドメインにどのように作用することにより,ポリフェノールがう蝕抑制効果を発揮するか調べた。ウーロン茶ポリフェノールはGTFのブルカン結合領域に結合し,グルコースの転移を阻害することにより,う蝕抑制効果を発揮することが明らかとなった。

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担当授業科目

  • 口腔健康発育学演習 (2023年度) 特別  - その他

  • 小児と障害児の歯科治療 (2023年度) 第4学期  - 木3

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2023年度) 第1学期  - 木1

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2023年度) 第1学期  - 木1

  • 小児口腔保健学(実習(臨床実習)) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児口腔保健学(講義・演習) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学実習 (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学演習 (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(演習・実習) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(講義・演習) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(演習・実習) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(講義・演習) (2023年度) 特別  - その他

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2023年度) 第1学期  - 木2

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2023年度) 第1学期  - 木2

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2023年度) 第2学期  - 木4,木5,木6,木7,木8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2023年度) 第2学期  - 木4~8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2023年度) 第2学期  - 木5,木6,木7

  • 早期見学実習 (2023年度) 特別  - その他

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2023年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS for foreign students) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS for foreign students 2) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS2) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS for foreign students 3) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS3) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯科医療演習 (2023年度) 1・2学期  - 火1~3

  • 歯科臨床専門医プラクティカムA(小児口腔保健学) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯科臨床専門医プラクティカムA(臨床小児歯科学) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯科臨床専門医プラクティカムB(小児口腔保健学) (2023年度) 特別  - その他

  • 歯科臨床専門医プラクティカムB(臨床小児歯科学) (2023年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(実習(臨床実習)) (2023年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(講義・演習) (2023年度) 特別  - その他

  • 口腔健康発育学演習 (2022年度) 特別  - その他

  • 小児と障害児の歯科治療 (2022年度) 第4学期  - 木3

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2022年度) 第1学期  - 木1

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2022年度) 第1学期  - 木1

  • 小児口腔保健学(実習(臨床実習)) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児口腔保健学(講義・演習) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(演習・実習) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(講義・演習) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(演習・実習) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(講義・演習) (2022年度) 特別  - その他

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2022年度) 第1学期  - 木2

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2022年度) 第1学期  - 木2

  • 成長・老化の人間学 (2022年度) 第4学期

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2022年度) 第2学期  - 木5,木6,木7

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2022年度) 第2学期  - 木4~8

  • 早期見学実習 (2022年度) 特別  - その他

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2022年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS) (2022年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS for foreign students) (2022年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS for foreign students 2) (2022年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS2) (2022年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS for foreign students 3) (2022年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS3) (2022年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(実習(臨床実習)) (2022年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(講義・演習) (2022年度) 特別  - その他

  • 口腔健康発育学演習 (2021年度) 特別  - その他

  • 小児と障害児の歯科治療 (2021年度) 第4学期  - 木3

  • 小児と障害児の歯科治療 (2021年度) 第4学期  - 木3

  • 小児と障害児者の歯科診療 (2021年度) 第4学期  - 木3

  • 小児の口腔保健指導 (2021年度) 第1学期  - 木2

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2021年度) 第1学期  - 木1

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2021年度) 第1学期  - 木1

  • 小児口腔保健学(実習(臨床実習)) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児口腔保健学(講義・演習) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(演習・実習) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(講義・演習) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(演習・実習) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(講義・演習) (2021年度) 特別  - その他

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2021年度) 第1学期  - 木2

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2021年度) 第1学期  - 木2

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2021年度) 第2学期  - 木4,木5,木6,木7,木8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2021年度) 第2学期  - 木4~8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2021年度) 第2学期  - 木5,木6,木7

  • 早期見学実習 (2021年度) 特別  - その他

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2021年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2021年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS for foreign students) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS for foreign students 2) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS2) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS for foreign students 3) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS3) (2021年度) 特別  - その他

  • 歯科恐怖と行動歯科学 (2021年度) 第1学期  - 木1

  • 臨床小児歯科学(実習(臨床実習)) (2021年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(講義・演習) (2021年度) 特別  - その他

  • 口腔健康発育学演習 (2020年度) 通年  - その他

  • 口腔健康発育学総論 (2020年度) 通年  - その他

  • 小児と障害児の歯科治療 (2020年度) 第4学期  - 木3

  • 小児と障害児の歯科治療 (2020年度) 第4学期  - 木3

  • 小児と障害児者の歯科診療 (2020年度) 第4学期  - 木3

  • 小児の口腔保健指導 (2020年度) 第1学期  - 木2

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2020年度) 第1学期  - 木1

  • 小児の成長発育と歯科疾患 (2020年度) 第1学期  - 木1

  • 小児口腔保健学(実習(臨床実習)) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児口腔保健学(講義・演習) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(演習・実習) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学I(講義・演習) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(演習・実習) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児歯科学II(講義・演習) (2020年度) 特別  - その他

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2020年度) 第1学期  - 木2

  • 小児齲蝕の予防と治療 (2020年度) 第1学期  - 木2

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2020年度) 第2学期  - 木4,木5,木6,木7,木8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2020年度) 第2学期  - 木4~8

  • 成長期の歯冠修復学実習 (2020年度) 第2学期  - 木5,木6,木7

  • 早期見学実習 (2020年度) 特別  - その他

  • 早期見学実習 (2020年度) 特別  - その他

  • 早期見学実習 (2020年度) 特別  - その他

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2020年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯・顎口腔領域の発育異常 (2020年度) 第4学期  - 木1,木2

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習(ODAPUS for foreign students) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS for foreign students 2) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習2(ODAPUS2) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS for foreign students 3) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯学国際交流演習3(ODAPUS3) (2020年度) 特別  - その他

  • 歯科恐怖と行動歯科学 (2020年度) 第1学期  - 木1

  • 細胞生物学 (2020年度) 3・4学期  - 火6,火7

  • 臨床小児歯科学(実習(臨床実習)) (2020年度) 特別  - その他

  • 臨床小児歯科学(講義・演習) (2020年度) 特別  - その他

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社会貢献活動

  • 岡山大学病院小児医療センター市民公開講座

    役割:講師

    2022年11月23日

メディア報道

  • 教えてヨミドック 新聞・雑誌

    読売東京  読売新聞  2020年10月16日

     詳細を見る

    執筆者:本人