Research Projects -
-
分化制御NK細胞を用いた免疫療法による新規肝炎/肝癌治療の開発研究（分担）
2022 - 2024
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構 肝炎等克服実用化研究事業 肝炎等克服緊急対策研究事業
團迫 浩方
Authorship：Coinvestigator(s)
-
効率的なHBV増殖細胞系、動物モデル系の確立とそれらを用いたHBV治療法開発（分担）
2021
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構 肝炎等克服実用化研究事業 Ｂ型肝炎創薬実用化等研究事業
團迫 浩方
Authorship：Coinvestigator(s)
-
多機能幹細胞を用いた免疫賦活化療法による新規肝炎/肝癌治療の開発研究（分担）
2021
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構 肝炎等克服実用化研究事業 肝炎等克服緊急対策研究事業
團迫 浩方
Authorship：Coinvestigator(s)
-
B型肝炎ウイルス感染に伴う細胞老化機構の分子生物学的解析
2021
公益財団法人 両備檉園記念財団 両備檉園記念財団研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
B型肝炎ウイルス感染により細胞外に放出されるDAMPsの同定
2019
公益財団法人 岡山医学振興会 岡山医学振興会研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
B型肝炎ウイルスの感染複製増殖機構解明による創薬基盤形成に関する研究（分担）
2017 - 2021
国立研究開発法人 日本医療研究開発機構 肝炎等克服実用化研究事業 Ｂ型肝炎創薬実用化等研究事業
團迫 浩方
Authorship：Coinvestigator(s)
-
Research on the mechanism of hepatocarcinogenesis by long-term replication of hepatitis virus
Grant number：16H05196 2016.04 - 2019.03
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B) Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Kato Nobuyuki, SEJIMA Hiroe, KOKU Irin, ONOMURA Daichi, HIRAMOTO Hiroki
Authorship：Coinvestigator(s)
Grant amount：\17420000 （ Direct expense: \13400000 、 Indirect expense：\4020000 ）
We studied to clarify the relation of long-term replication of HBV or HCV and hepatocarcinogenesis, and then obtained the following results. (1) We clarified that VCX2 and AGR2 contributed to the expression control of the CPB2 gene whose expression level was remarkably decreased by the long-term HCV replication. (2) We successfully established two cloned cell lines exhibiting high HBV susceptibility by the subcloning of human immortalized hepatocyte NKNT-3 cells and human hepatoma Li23 cells. (3) We identified several genes whose expression levels significantly changed before and after HBV infection. (4) We developed the purification and quantitative methods for exosome produced from cultured cells. We demonstrated that the amount of exosome produced from HBV insusceptible cells was significantly higher than that of HBV susceptible cells.
-
全長HCV RNA複製肝がん細胞株由来のエクソソーム内に存在するナチュラルキラー細胞を制御する機能性分子の同定
2016
ギリアド・サイエンシズ株式会社 ギリアド・サイエンシズ株式会社研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
B型肝炎ウイルスを認識する宿主因子cGASを特異的に亢進する薬剤の探索
2016
公益財団法人 山陽放送学術文化財団 山陽放送学術文化財団研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
The mechanism of natural killer cell-mediated recognition against hepatitis virus infection.
Grant number：15K08498 2015.04 - 2018.03
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C) Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Dansako Hiromichi
Authorship：Principal investigator
Grant amount：\4940000 （ Direct expense: \3800000 、 Indirect expense：\1140000 ）
In the present study, we demonstrated that hepatitis C virus (HCV) induced the cell surface expression of ULBP1 in human immortalized hepatocyte PH5CH8 cells and human hepatoma HuH-7 cell-derived RSc cells. Interestingly, NK cell line NK-92 induced cytotoxicity and interferon (IFN)-γ mRNA expression and subsequently reduced the levels of HCV RNA replication during the co-culture with HCV-infected RSc cells. We also suggested that NK-92 cells were stimulated by viral dsRNA relaesed from HCV-infected RSc cells and subsequently induced IFN-γ. From these results, we conclude that ULBP1 is a target of the NK cell-mediated innate immune response in HCV-infected human hepatocytes.
-
B型肝炎ウイルス(HBV)の感染増殖を制御する分子機構の解明
2015
公益財団法人 ウエスコ学術振興財団 ウエスコ学術振興財団研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
B型肝炎ウイルスによるインターフェロン-a抵抗性機構の解明
2014
公益財団法人 両備檉園記念財団 両備檉園記念財団研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
Research on host factors which are involved in the progression of HCV-induced hepatic deseases
Grant number：25293110 2013.04 - 2016.03
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (B) Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
KATO NOBUYUKI, IKEDA Masanori, DANSAKO Hiromichi, SATOH Shinya
Authorship：Coinvestigator(s)
Grant amount：\17030000 （ Direct expense: \13100000 、 Indirect expense：\3930000 ）
We studied to clarify the relation of long-term replication of HCV RNA and hepatocarcinogenesis, and then obtained the following results. (1) Regarding CPB2 and BASP1 genes, whose expression levels were remarkably suppressed by long-term replication of HCV RNA, we analyzed the molecular mechanism of the gene suppression, and partly elucidated it. (2) We found that miR-22 and miR-34a were significantly suppressed by long-term replication of HCV RNA. (3) We developed the reproducible and stable method that we could prepare exosome derived from human hepatocytes, and then we applied this method to the variability analysis of exosome in the long-term culture of HCV RNA-replicating cells. (4) Using immortalized human hepatocytes, we tried the development of a new model of HCV RNA-replicating cells, and then obtained the useful knowledge for future study.
-
エクソソームを介したC型肝炎ウイルス感染・非感染細胞間自然免疫応答シグナル伝達機構の解明
2013
公益財団法人 岡山医学振興会 岡山医学振興会研究助成 研究助成
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
Development ofthe infection and proliferation systemof the 1bgenotype HCV based on the new idea
Grant number：24659207 2012
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
KATO Nobuyuki, DANSAKO Hiromichi, MORI Kyoko
Authorship：Coinvestigator(s)
Grant amount：\3770000 （ Direct expense: \2900000 、 Indirect expense：\870000 ）
We tried the development of the infection and proliferation system of the 1b genotype hepatitis C virus (HCV) using human cultured cell lines. In this study, HCV-positive serum (1b genotype) was added tothe human hepatoma cell line Li23, which was found in 2009 as a cell line permitting the reproduction of the HCV RNA and human hepatoma cell line HuH-7 frequently used all over the world. We performed HCV infection under various conditions, however, we did not succeed to demonstrate an increase of the HCV. As one of the causes, we found that expression level of CLDN1, which was one of the HCV receptors, became very low, and thatthe supplement of CLDN1 expression was necessary.
-
C型肝炎ウイルスに関する研究
2009
公益財団法人 上原記念生命科学財団 海外留学助成リサーチフェローシップ 海外留学助成リサーチフェローシップ
團迫 浩方
Authorship：Principal investigator
-
Disruption of innate immune response by hepatitis C virus
Grant number：19790340 2007 - 2008
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Young Scientists (B) Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
DANSAKO Hiromichi
Grant amount：\3650000 （ Direct expense: \3200000 、 Indirect expense：\450000 ）
C型肝炎ウイルス(HCV)による自然免疫システムの撹乱機構の解明を目的として行った研究において、以下のような成果を得た。(1)従来の報告とは異なり、NS3-4A蛋白質はTRIF蛋白質を切断しておらず、自然免疫機構の抑制はRIG-I/IPS-1経路に限定されていた。(2)NS5B蛋白質によるIFN-βの産生はTLR3経路およびRIG-I/MDA5経路の活性化、さらには両経路の下流の転写因子IRF-3の活性化を経て誘導されていた。(3)NS5B蛋白質によるIFN-βの産生誘導はTRAF3やTRAF6のノックダウンにより亢進することを示した。また、活性化されたIRF-3の調節にTRAF6が関与している可能性が示唆された。(4)PH5CH8細胞において、NS5Bは二本鎖RNAを産生していることを示した。これらの研究成果により、HCVはこれら分子との相互作用により自然免疫システムを撹乱している可能性が示唆された。
-
C型肝炎ウイルス治療薬の新規スクリーニングシステムの構築
Grant number：17790308 2005 - 2006
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Young Scientists (B) Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
團迫 浩方
Grant amount：\3400000 （ Direct expense: \3400000 ）
C型慢性肝炎患者に対する治癒率の改善のためには、現在のインターフェロン(IFN)とリバビリンの併用療法の改善だけでなく、IFNよりもC型肝炎ウイルス(HCV)の排除に効果的な薬剤をスクリーニングすることも重要である。そこで、従来のシステム(レポーター蛋白質の酵素活性を利用し、細胞内のHCV RNA複製レベルを定量、しかし生細胞のままの定量は困難)より簡便かつ安価に大規模な薬剤スクリーニングを遂行するために、緑色蛍光蛋白質であるEGFPをレポーター蛋白質に用いて、生細胞のままHCV RNA複製レベルの定量を可能にするシステムの開発を試みた。前年度までに、このシステムに必要なEGFP遺伝子を含む全長HCV RNA複製細胞を数クローン樹立することができ、細胞内でのHCV蛋白質およびEGFPの発現や、EGFPによる蛍光は観察できている。今年度は、この樹立した全長HCV RNA複製細胞を用いて、生細胞のままHCV RNA複製レベルを定量できるシステムの構築を行った。樹立できた数クローンのうち、OGN/C-5B/KE細胞(EGFP遺伝子をネオマイシン耐性遺伝子の前に、また適応変異としてNS3領域にK1609Eのアミノ酸置換を導入した全長HCV RNAが持続的に複製している細胞)のあるクローンが最も効率よく経時的に蛍光強度を上昇していることが確認できた。この細胞にIFN-αを処理し、その蛍光強度を生細胞のまま測定したところ、IFN-αの濃度依存的に減少していた。また、その値は、リアルタイムPCR法により定量したHCV RNA量と相関していた。また、ウエスタンブロット法により、EGFPやHCVコア蛋白質も減少していることが確認された。IFN-α以外に、HCVの排除に効果を示すことが報告されているIFN-β、IFN-γ、シクロスポリンAやフルバスタチンを同様に処理したところ、その蛍光強度とHCV RNA量の値は相関していた。また、IFN-αとシクロスポリンAあるいはIFN-αとフルバスタチンの併用処理は、それぞれの単剤処理に比べ、その蛍光強度は減少していた。これらの結果は、生細胞のままHCV RNAの複製レベルを定量することができるシステムを開発することができ、また、種々の薬剤処理も可能であることを示している(今研究実績は、現在、投稿準備中である)。