研究者詳細 - 今村　維克

MISC - 今村　維克

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Effects of the Cultivation Method on the Characteristics or Gene Expression Profiles of Aspergillus oryzae Using mCD or DPY Media

Imanaka Hiroyuki, Tanaka Soukichi, Feng Bin, Imamura Koreyoshi, Nakanishi Kazuhiro

Memoirs of the Faculty of Engineering, Okayama University 44 73 - 83 2010年1月

記述言語：英語出版者・発行元：Faculty of Engineering, Okayama University

We used modified Czapek-Dox (mCD) or dextrin-peptone-yeast extract (DPY) media to cultivate a filamentous fungus, Aspergillus oryzae IAM 2706 by three different cultivation methods, i.e., shaking-flask culture (SFC), agar-plate culture (APC), and membrane-surface liquid culture (MSLC), to identify the differences in cultivation behaviors and gene transcriptional profiles. The fungi cultivated by APC or MSLC secreted a greater number of different proteins/enzymes in larger quantities compared with fungi cultivated by SFC, particularly when DPY medium was used. In particular, the amounts of protease secreted by fungi cultivated via MSLC or APC were much greater compared with SFC. When mCD medium was used, α-amylase activity was barely detectable in all cultures while the activity was detected in MSLC and APC in a quantity that was several times higher than that in SFC using DPY medium. SDS-PAGE analysis and N-terminal amino acid sequences confirmed 6 proteins in the culture supernatants when DPY medium was used. Among these proteins oryzin (an alkaline protease) and α-amylase were detected at much higher levels in APC and MSLC compared with SFC, which was consistent withthe measured activity of the secreted enzymes. However, when mCD medium was used, only oryzin was detected in significant amounts in MSLC and APC. Microarray analyses of the fungi cultivated by SFC, APC or MSLC using either mCD or DPY media indicated that the gene transcriptional profile of the MSLC sample was similar to that of the APC sample but different from that of the SFC sample. When mCD medium was used, most of the genes that were up-regulated 10-folds or greater in the MSLC sample relative to the SFC sample were unknown or predicted proteins. Transcription of the oryzin gene was only slightly up-regulated in the MSLC sample while transcription of the α-amylase gene was slightly down-regulated. On the other hand, when DPY medium was used, many known genes including the oryzin gene were up-regulated in the MSLC sample versus the SFC sample.

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2P-1103 オートトランスポーターを用いた大腸菌細胞表層提示系におけるアミノ酸配列の影響(2bタンパク質工学,一般講演,酵素学,タンパク質工学および酵素工学,伝統の技と先端科学技術の融合)

今中洋行, 植田久子, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 22 34 - 34 2010年

3P-1055 Multiformity of β-Galactosidase Produced from Bacillus circulans :

SONG Jingyuan, IMANAKA Hiroyuki, IMAMURA Koreyoshi, MINODA Masashi, YAMAGUCHI Shoutaro, NAKANISHI Kazuhiro

日本生物工学会大会講演要旨集 22 71 - 71 2010年

3P-1085 機能的ペプチド固定化法を利用したCysteine Synthase複合体形成における機能性残基の同定(2bタンパク質工学,一般講演,酵素学,タンパク質工学および酵素工学,伝統の技と先端科学技術の融合)

清水友樹, 今中洋行, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 22 79 - 79 2010年

MN-P23 Development of peptide immobilization method using PS-tagged cushion protein(Section X Micro/Nano Technology for Analysis and Cell Manipulation)

Imanaka Hiroyuki, Yamazumi Daisuke, Kunikata Toshinobu, Imamura Koreyoshi, Nakanishi Kazuhiro

Journal of bioscience and bioengineering 108 ( 1 ) S161 2009年11月

酵素糖化と発酵を併用した小麦フスマからの効率的エタノール生産

是石真友子, 今中洋行, 今村維克, 狩山昌弘, 中西一弘

生物工学会誌 : seibutsu-kogaku kaishi 87 ( 5 ) 216 - 223 2009年5月

記述言語：日本語出版者・発行元：日本生物工学会

小麦フスマを原料として用い,市販酵素製剤による糖化反応と酵母によるエタノール発酵を併用した効率的エタノール生産方法の構築のために必要なバイオマスの前処理条件および糖化のための酵素の組み合わせなどの検討を行った.糖化反応条件としては,小麦フスマを140℃で保持時間0hの条件下で水熱処理を行い,反応温度45℃でMeiselaseおよびNovozyme^[○!R]188の2種類の酵素製剤を用いて糖化することが,グルコース生成に対して最も効果的であることがわかった.3.3%(w/v)の水熱処理小麦フスマから理論値の90%に相当するグルコースが生成した.しかし,33%(w/v)の水熱処理小麦フスマを用いた場合には,理論値の72%のグルコースしか生成しなかった.この理由として,反応生成物であるグルコースのβ-グルコシダーゼに対する阻害の影響が考えられた.しかし,酵素糖化を45℃で24時間行った後に,酵母を添加し30℃でエタノール発酵を行うと,糖化反応とグルコース消費が併行して起こるために阻害効果が緩和され,その結果,理論値の88%に相当する約5.2%(w/v)のエタノールが生成した.

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2Ea05 オートトランスポーターを用いたペプチド細胞表層提示系の検討(タンパク質工学,一般講演)

植田久子, 山下麻衣, 今中洋行, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 21 59 - 59 2009年

2Ip05 クッションタンパク質を利用したペプチドータンパク質間相互作用検出系の検討(バイオセンシング・分析化学,一般講演)

今中洋行, 國方俊暢, 山之内麻衣, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 21 126 - 126 2009年

2Da01 放線菌Streptomyces mobaraensis由来新規アミノアシラーゼの発現系の構築および特性解析(酵素学・酵素工学,一般講演)

多井愛美, 中谷泰之, 是石真友子, 今中洋行, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 21 44 - 44 2009年

3Ga07 ヒトFOXP3-DNA相互作用の迅速検出システムの構築(酵素学,酵素工学,タンパク質工学,糖鎖工学,一般講演)

前川真光, 今中洋行, 今村維克, 近藤英作, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 20 186 - 186 2008年

2Aa03 組換えモノグリセリドリパーゼの精製及び生化学的特性解析(プロセス工学,一般講演)

寺川秀嗣, 森真基, 今中洋行, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 20 59 - 59 2008年

3Da04 クッションタンパク質を用いたバイオ分子固定化技術(分析化学・物理化学,一般講演)

今中洋行, 山隅大輔, 柳田圭介, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 20 126 - 126 2008年

新規アシラーゼを用いた食品タンパク質のプロテアーゼ消化ペプチド断片への脂肪酸付加と機能性の調査

中西一弘, 今村維克, 今中洋行

食に関する助成研究調査報告書 ( 21 ) 109 - 115 2008年

Enzymatic Synthesis of β-Lactam Antibiotics and N-Fatty-Acylated Amino Compounds by the Acyl-Transfer Reaction Catalyzed by Penicillin V Acylase from Streptomyces mobaraensis

Koreishi Mayuko, Tani Kazuha, Ise Yuuichi, IMANAKA Hiroyuki, IMAMURA Koreyoshi, NAKANISHI Kazuhiro

Bioscience, biotechnology, and biochemistry 71 ( 6 ) 1582 - 1586 2007年6月

記述言語：英語出版者・発行元：公益社団法人日本農芸化学会

Penicillin V acylase from Streptomyces mobaraensis (Sm-PVA) showed high acyl-transfer activity in reactions using methyl esters of carboxylic acid (acyl donor) and amino compounds (nucleophile), to produce the corresponding amides. Moreover, Sm-PVA had broad substrate specificity, as indicated by the fact that it catalyzed the efficient synthesis of &beta;-lactam antibiotics, capsaicin derivatives, and N-fatty-acyl-amino acid/N-fatty-acyl-peptide derivatives.

DOI： 10.1271/bbb.70052

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1C11-2 放線菌Streptomyces mobaraensis由来ペニシリン V アシラーゼのアシル基転移反応を利用した機能性化合物の酵素合成(酵素学・酵素工学・タンパク質工学,一般講演)

是石真友子, 伊勢雄一, 谷和葉, 今中洋行, 今村維克, 中西一弘

日本生物工学会大会講演要旨集 19 79 - 79 2007年